IMEX   05356
INSTITUTO DE MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Diversidad genética del complejo Mycobacterium avium mediante MIRU‐VNTR. .
Autor/es:
BR IMPERIALE, RD MOYANO, MA ROMERO, MF ALVARADO PINEDO, MP SANTANGELO, GE TRAVERÍA, AB DI GIULIO, NS MORCILLO, MI ROMANO
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; SLAMTB; 2016
Resumen:
Introducción. Las especies comprendidas dentro del complejo Mycobacterium avium (MAC) son patógenos oportunistas que causan micobacteriosis en animales y humanos. Los principales miembros del MAC son M. avium sp hominissuis (MAH), M. avium sp avium (MAA) y M. avium sp. paratuberculosis (MAP). MAH causa enfermedad diseminada en pacientes inmunosuprimidos y MAP una enteritis crónica en rumiantes. Ambas micobacterias están involucradas en un potencial rol zoonótico. Objetivo. Describir la diversidad genética de las especies del MAC causantes de enfermedad en diferentes huéspedes en Argentina. Materiales y métodos. Fueron incluidos 26 aislamientos de MAH y 61 de MAP a partir de muestras clínicas humanas y de ganado bovino respectivamente. Las muestras clínicas humanas fueron procesadas con una mezcla de NaCl 7%‐NaOH 4% y cultivadas en medios sólidos y líquidos. Las muestras de ganado bovino fueron decontaminadas usando el cloruro de hexadecyl‐pyridinio y cultivados en Herrold con micobactina. Las micobacterias fueron detectadas mediante tinción de Ziehl‐Neelsen y las especies se identificaron por GenoType CM® (muestras humanas). Mediante PCR de IS1311 se confirmó la pertenencia al MAC, la PCR de IS900 se utilizó para identificar MAP y la de IS901 para diferenciar entre MAH and MAA. La genotipificación de los aislamientos fue realizada mediante el análisis por MIRU‐VNTR de los loci 292, X3, 25, 47, 3, 7, 10 y 32. Los patrones INMV fueron asignados de acuerdo con la base de datos internacional (http://mac‐inmv.tours.inra.fr/). La diversidad alélica (D) y el índice de discriminación de Hunter and Gaston (HGDI) fueron calculados a través de http://insilico.ehu.es/mini_tools/discriminatory_power/index.php. Resultados. El 95.4% de los aislamientos (n: 83) dieron resultados válidos. El 84.6% (n: 22) de los aislamientos de MAH fueron genotipificados, agrupándose 16 de ellos entre 5 patrones de INMV (INMV 92, n: 4; INMV 121, n: 4; INMV 97, n: 2; INMV 103, n: 2, INMV 50, n: 2 e INMV 40, n: 2), 6 tuvieron patrones no conocidos (NC), y los 4 restantes una incompleta genotipificación. Para los aislamientos de MAH, el HGDI fue de 0.930. Los loci X3 y 25 fueron los de mayor D (0.5844), seguidos por el locus 292 con D: 0,5714 y el 7 con un D: 0.4848. Con respecto a los aislamientos de MAP, el 100% fue genotipificado. El INMV 1 y el INMV 2 fueron los predominantes (INMV 1, 44.2% e INMV 2, 27.9%), seguidos de los INMV 11 (21.3%), INMV 8 (3.3%) e INMV 5 (3.3%). El HGDI fue de 0.6984 y los loci 7 y 292 tuvieron los mayores D, 0.698 y 0.505, respectivamente. Conclusiones. La mayoría de los aislamientos pudieron ser genotipificados, presentando MAH mayor diversidad que MAP. Los patrones de INMV, D y HGDI para MAP están en concordancia con los reportados previamente en Argentina (no existen datos previos para MAH aislados de humanos). Un mayor conocimiento de la diversidad del MAC podría ayudar a mejorar el control y manejo de estas enfermedades.