Impacto del programa de activación del macrófago sobre la acumulación de lípidos intracelulares y diferenciación hacia macrófagos espumosos en Tuberculosis

KVIATCOVSKY D; GONZÁLEZ-DOMÍNGUEZ E; HERNÁNDEZ-PANDO R; MORAÑA E; GONZÁLEZ MONTANER P; SASIAIN MC; GENOULA M; MATA-ESPINOZA D; SÁNCHEZ-TORRES C; BALBOA L

Rosario

Congreso; Reunión de la Sociedad Latinoamericana de Tuberculosis y otras Micobacteriosis (SLAM-TB); 2016

Sociedad Latinoamericana de Tuberculosis y otras Micobacteriosis

Frente a una infección bacteriana intracelular, las células eucariotas sufren adaptaciones metabólicas que por un lado le ayudan a eliminar al patógeno, pero por el otro podrían ser aprovechadas por el microbio para obtener nutrientes y metabolitos, cubriendo sus necesidades energéticas. Mycobacterium tuberculosis (Mtb) es un patógeno humano altamente virulento que infecta aproximadamente a un tercio de la población mundial. Una vez que Mtb ingresa al pulmón, éste es fagocitado por macrófagos alveolares en los que algunas bacterias resisten sus mecanismos microbicidas y persisten. La habilidad de Mtb para persistir y causar tuberculosis depende de sus numerosas estrategias de evasión inmune, las cuales incluyen la desregulación del metabolismo de los lípidos en macrófagos, induciendo la formación de macrófagos espumosos (FM). Sin embargo, aún no se conocen los factores específicos de la célula hospedera que llevan a la inducción de FM. En base a estos datos, el objetivo fue evaluar si los distintos perfiles de macrófagos, a saber M1, M2a, y M2c, difieren en su capacidad de acumular cuerpos lipídicos (LB) durante la infección con Mtb. Los perfiles de los macrófagos fueron generados y cultivados en presencia de efusiones pleurales de pacientes con tuberculosis (TB-PE) o con fallas cardíacas (HF-PE). La acumulación de LB fue evaluada por tinción con Oil Red O y BODIPY, la producción de IL-10 y TNF-α por ELISA, de pSTAT-3 por FACS y western blot, de especies reactivas del oxígeno (ROS) con DHR, la capacidad presentadora de antígenos mediante el método de dilución de CFSE de linfocitos marcados, y la carga bacteriana por numeración de unidades formadoras de colonias (UFC).A excepción de HF-PE, TB-PE indujo la acumulación de LB en M2, M2c y M1 (n=8). Sin embargo M2a no acumuló lípidos. Como se encontraron altos niveles de IL-10 y TNF-α en PE-TB (n=5), evaluamos el efecto de la depleción de estas citoquinas. A diferencia de TNF-α, la depleción de IL-10 previno la diferenciación de FM (n=8). Además, PE-TB o la adición de IL-10 indujo la expresión de CD36, el cual media el ingreso de lípidos a la célula, y el aumento de los niveles de pSTAT-3, el cual gobierna el programa de M2c (n=5). Particularmente, la inhibición de pSTAT-3 evitó la acumulación de lípidos (n=3). En términos de función, TB-PE afectó específicamente la producción de ROS y la proliferación de células CD4+ productoras de IFN-γ inducidas por el perfil M1, a diferencia de M2a (n=4). Por otro lado, M2c careció de ambas funciones independientemente de la exposición a TB-PE. Finalmente, la exposición de los perfiles M1 y M2c a TB-PE promovió el crecimiento intracelular de Mtb, lo cual resultó ser dependiente de la presencia de IL-10 (n=10). Por lo tanto, los perfiles de los macrófagos difieren en su tendencia a acumular cuerpos lipídicos, proceso que requiere la activación del eje IL-10/STAT-3 y que resulta en un fenotipo inmunosupresivo, afectando la respuesta inmune del hospedero contra Mtb.