Potencial del MALDI-TOF en sepsis como instrumento diagnóstico

NOEMÍ YOKOBORI; ROXANA PAUL ; BEATRIZ LÓPEZ; JOHANA MONTESERIN; BÁRBARA REARTE; MONICA PRIETO; MARTIN ISTURIZ

CABA

Taller; II Taller Internacional de identificación microbiológica por Espectrometría de Masas; 2016

RENAEM

La sepsis constituye un fenómeno extremadamente complejo. Así, la respuesta séptica es una cadena de diversos eventos relacionados que involucran procesos inflamatorios y antiinflamatorios, respuestas humorales y celulares, alteraciones en los procesos de coagulación, etc que varían en el tiempo. Dada la complejidad y lo dinámico de esta patología, uno de las principales dificultades que se encuentra en la clínica es conocer o identificar posibles marcadores biológicos que nos permitan establecer un diagnóstico rápido y preciso y nos ubique en el curso de la patología pudiendo establecer en qué estadio se encuentra el paciente a fin de dirigir el enfoque terapéutico. En este sentido el objetivo general de este trabajo consiste en la búsqueda de posibles ?huellas? de perfiles de biomoléculas que correlacionen con diferentes estadios de la sepsis adquiriendo de esta manera una herramienta diagnóstica distintiva para cada estadio, posibilitando así establecer una estrategia terapéutica adecuada y precisa. Para ello, y teniendo en cuenta que más del 60% de las sepsis se dan por bacterias Gram-negativas cuyos lipopolisacáridos (LPS) constituyen uno de los agentes principales asociados tanto a los procesos inflamatorios como antiinflamatorios de la sepsis, desarrollaremos un modelo experimental murino en el cual, utilizaremos 3 esquemas diferentes de administración del LPS a fin de ?simular? tres estadios diferenciales que se dan en el curso de una sepsis: 1) cuadro hiper-inflamatorio, 2) tolerancia a LPS, 3) inmunosupresión. Muestras de plasmas de los tres estadios serán analizados mediante la técnica de MALDI-TOF y se evaluarán los perfiles de biomoléculas. En este contexto los objetivos específicos son: a) Definir mediante el estudio de variables pro/anti-inflamatorias e inmunológicas las características distintivas de los 3 estadios de estudio desarrollados mediante la administración de LPS. b) Evaluar diferentes tiempos de recolección de plasma a fin identificar patrones biomoleculares diferenciales entre los 3 estadios mediante la técnica de MALDI-TOF. Además se evaluarán diferentes formas de procesamiento de la muestra con el objeto de aumentar la reproducibilidad y especificidad.