IMEX   05356
INSTITUTO DE MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio Molecular de Marcadores Genéticos en Neoplasias Mieloproliferativas BCR-ABL1(-)
Autor/es:
SCHEPS, KAREN; MOIRAGHI, BEATRIZ; BRODSKY, ANDRÉS; CASTRO RÍOS, MIGUEL; HELLER, PAULA; DE BRASI, CARLOS; ENRICO, ALICIA; LARRIPA, IRENE
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; 16º Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas; 2016
Resumen:
Introducción y objetivosLas neoplasias mieloproliferativas BCR-ABL negativas (NMP) clásicas incluyen a la Policitemia Vera (PV), Trombocitemia Esencial (TE) y Mielofibrosis (MF). En la última década se identificaron mutaciones iniciadores específicas (drivers) de estas patologías en los genes: JAK2 MPL y CALR. Además se detectaron otras mutaciones en reguladores epigenéticos asociadas a progresión de enfermedad también llamadas mutaciones cooperadoras. Teniendo en cuenta la importancia de estos estudios en el diagnóstico y pronóstico de las NMP los objetivos del trabajo fueron:- Evaluar la prevalencia y distribución de las mutaciones drivers en las NMPs en población local. - Caracterizar mutaciones cooperadoras en ASXL1 en pacientes con MF. - Evaluar la carga alélica de la mutación JAK2V617F y su correlación con el fenotipo de la enfermedad.Materiales y MétodosEl estudio se realizó a partir de ADN genómico de leucocitos de sangre periférica de 113 pacientes con NMP clásicas. Se estudió en primer lugar la presencia de la mutación JAK2V617F por DARMs-PCR. En los pacientes negativos para esta mutación se analizó el exón de 9 del gen CALR por PCR y en los casos donde no se detectaron mutaciones se investigó el exón 10 del gen MPL por PCR-secuenciación. En 16 pacientes con MF se buscaron mutaciones en el exón 13 del gen ASXL1 por PCR-secuenciación. La carga alélica de la mutación JAK2V617F se evaluó por PCR Real Time en 76 pacientes, teniendo en cuenta la amplificación del alelo mutado respecto del total (JAKV617F+JAKWT). El análisis estadístico se realizó con el programa GraphPad Prism 5.ResultadosLos resultados obtenidos en la detección de las mutaciones drivers se resumen en la Tabla 1:DiagnósticoNº de casosMutaciones driversJAK2V617FCALRMPLPV5650 -- TE3322 7 0 MF2420 01Las mutaciones en el exón 9 del gen CALR solo se detectaron en 7 pacientes con TE, 5 casos fueron de Tipo 1 (deleción de 52 pb) y 2 de Tipo 2 (inserción de 5pb). La mutación W515K (c.1543_1544TG>AA) en el gen MPL se detectó en 1 paciente con MF. Se identificó en MF una mutación en el gen ASXL1: c.1900_1922del (p.Glu635ArgfsX15), que genera un corrimiento del marco de lectura con la aparición de un codón stop prematuro.Se compararon los valores de carga alélica de la mutación JAK2V617F en las distintas entidades, encontrándose menor carga en TE respecto de PV (test de Kruskal-Wallis/ test post hoc de Dunn, p= 0,0453). Conclusiones:La NMP con mayor prevalencia es la PV. La frecuencia de las mutaciones drivers mostró una distribución coincidente con lo reportado en la literatura para PV y TE, mientras que en MF se observan discrepancias observándose una mayor proporción de casos JAK2V617F positivos y una menor proporción de CALR mutado respecto de lo publicado.La mutación en el exón 9 del gen CALR de tipo 1 presentó mayor prevalencia que las de tipo 2 y se observaron solamente en casos con TE.El estudio de la carga alélica de la mutación JAK2V617F mostró que la TE fue la patología que presentó menores niveles, siendo esta diferencia significativa respecto de PV, aunque todavía no pudo asociarse a otros parámetros clínicos.Se espera que la evaluación de estos marcadores pueda contribuir al diagnóstico y al seguimiento de los pacientes con NMP.