Análisis comparativo del estado mutacional y rearreglos del gen IGHV en pacientes con linfoma de células del manto y leucemia linfocítica crónica

CARMEN STANGANELLI; JULIETA PANERO; PATRICIA DOS SANTOS; BARBARA A. SANTANA-LEMOS; RODRIGO CALADO; IRMA SLAVUTSKY

Mar del Plata

Congreso; XXII Congreso Argentino de Hematología; 2015

Sociedad Argentina de Hematología

Introducción. La literatura muestra hipermutación somática del gen IGHV (immunoglobulin heavy chain variable region) en el 15-40% de los linfomas de células del manto (LCM), con un fuerte sesgo en el repertorio utilizado. Asimismo, la presencia de receptores estereotipados sugiere un fuerte rol de la selección antigénica en la expansión clonal de las células tumorales. Objetivo. Efectuar el análisis del estado mutacional y del repertorio de genes IGHV en pacientes con LCM y compararlo con lo observado en leucemia linfocítica crónica (LLC). Material y métodos. Se estudiaron 30 pacientes con LCM (23 varones; edad media 63 años) y 140 con LLC (90 varones; edad media: 65 años; 81,7% en estadios iniciales). Se efectuó PCR empleando primers sentido específicos para las familias VH1-VH7 y consenso antisentido JH o Cµ, y posterior secuenciación, utilizando las bases de datos IMGT/V-QUEST e IgBlast para su análisis. Resultados. Los pacientes fueron divididos acorde al porcentaje de homología con la línea germinal (LG), según criterios previamente establecidos.En LCM, VNM (verdadero NM) (100% de homología; 26,7% de los casos), mínimamente M (MM) (99,9%-97%; 53,3%) y altamente mutado (AM) (<97%; 20%). En LLC, mutado (M) (<98%; 59,6% de los casos) y no mutado (NM) (>98%; 40,4%). El 56% de estos pacientes presentaron <97% de homología, mostrando una mayor carga mutacional respecto de LCM (20%) (p=0,0005).  Las familias VH5, 6 y 7 estuvieron ausentes en LCM y sus porcentajes fueron muy bajos en LLC. En ambas entidades detectamos mayor uso de la familia VH3 seguida de VH4 y VH1. En LCM se encontró un repertorio reducido de genes VH: IGHV3-21, IGHV4-34, IGHV3-23 e IGHV4-39 (66,7% del total), en tanto que en LLC los genes más frecuentes fueron IGHV1-69, IGHV3-23, IGHV4-34, IGHV3-21 e IGHV3-49 (38,3% del total). El gen IGHV1-69, no se encontró representado en LCM, siendo el de mayor frecuencia en LLC. En ambas patologías los genes J y D predominantes fueron J6, J4 y D3, D2 y D6, respectivamente. En LCM se observó un uso sesgado de IGHV3-21 con D3-3 y J6 y de IGHV4-34 con D2-2 y J4, detectándose un solo caso con receptores estereotipados (3,3%) correspondiente al cluster #8. Por el contrario, en LLC se observaron receptores estereotipados en 18 casos (12,9%), siendo los clusters más representados: #2, #4 y #7. Conclusión. El estado mutacional de IGHV, así como el uso de ciertos genes específicos y la presencia de receptores estereotipados fue diferente en cada patología. En LCM se observó un repertorio más restringido de genes IGHV y una menor carga mutacional respecto de LLC. Nuestros datos y los previamente reportados en la literatura sustentan la presencia de estímulos antigénicos en el desarrollo y la patogénesis de ambas entidades, con características específicas en cada una de ellas.