Estudio comparativo in vitro de la actividad apoptótica del imatinib original y un bioequivalente farmacológico en la línea celular K562 Bcr-Abl positiva.

PALMITELLI M; DE CAMPOS NEBEL M; GONZÁLEZ-CID MB; LARRIPA I

Mar del Plata

Congreso; XXII Congreso Argentino de Hematología; 2015

Sociedad Argentina de Hematología

IntroducciónLa incorporación de los inhibidores de tirosina kinasa (ITK) marca el mayor avance y cambio radical en el tratamiento de la leucemia mieloide crónica (LMC). El mecanismo de acción de los ITKs consiste en bloquear, con alta afinidad y especificidad, el sitio de unión del ATP de la tirosina kinasa BCR-ABL1, logrando de este modo que la célula tumoral pierda su ventaja proliferativa y se induzca la apoptosis celular.ObjetivoTeniendo en cuenta que, en la actualidad existen numerosos bioequivalentes de los ITKs con acción farmacológica variable, el objetivo del presente trabajo fue evaluar la efectividad biológica del inhibidor genérico (imatinib Elea o Imatinova) respecto al ITK original (imatinib Glivec) analizando la inducción de apoptosis in vitro en una línea celular BCR-ABL1 positiva (K562). Material y métodosLas células de la línea K562 (ATCC CCL-243) crecieron en suspensión en medio RPMI 1640, 10% de suero fetal bovino y antibióticos en estufa a 37ºC con 5% de CO2. Los comprimidos de 400 mg de cada ITK se disolvieron en 200 ml de agua destilada estéril. Las células (5 X 105/placa de cultivo) se trataron con concentraciones crecientes: 0,25; 0,5; 1,0; 2,5 y 5,0 µM del inhibidor genérico y del original durante 72 hs evaluando la apoptosis morfológica (cromatina altamente condensada o fragmentada de etapas tardías) con coloración de naranja de acridina / bromuro de etidio por microscopía de fluorescencia. Además, las células se trataron con 2,5 µM de ambos ITK durante 24, 48 y 72 hs analizando la apoptosis temprana mediante anexina V-FITC por citometría de flujo. Los cultivos controles sin el agregado de ITKs permitieron evaluar la apoptosis basal espontánea de la línea celular K562. ResultadosA las 72 hs, el porcentaje de apoptosis morfológica en el cultivo control fue de 3,0±1,2%. En los cultivos expuestos a los ITKs genérico u original, la apoptosis se incrementó en relación a las concentraciones ensayadas, alcanzando a la dosis de 5,0 µM un valor de 43,0±2,0% y 44,6±9,1% (p