Trampas extracelulares de neutrófilos: cuando la genética limita la defensa.

DE LARRAÑAGA GABRIELA; CHAPELA, S; ARANDA, F; KNACKSTEDT, L; BRINKMANN, V; PERÉS, S; DOMINGUEZ, C; NOGUERAS, M; SAN JUAN, J; SOLOAGA, E; BALLESTERO, F; POZNER, ROBERTO G.; DE LARRAÑAGA GABRIELA

CABA

Congreso; XV Congreso de la Sociedad Argentina de Infectología (SADI).; 2015

Sociedad Argentina de Infectología (SADI)

Introducción: los neutrófilos activados capturan y matan patógenos mediante la liberación de trampas extracelulares de neutrófilos (NETs) compuestas de ADN, histonas y proteínas antimicrobianas. Sin embargo, las NETs formadas en microvasculatura provocan injuria endotelial, contribuyendo a la falla multiorgánica y muerte durante la sepsis. La ADNasa I humana jugaría un rol clave en la eliminación de NETs, y polimorfismos (SNPs) en el gen podrían estar involucrados en el agravamiento o falla en los mecanismos que limitan las infecciones. Objetivos: poner a punto un ELISA para medir NETs plasmático, analizar SNPs no sinónimos en el gen de la ADNasa I y buscar asociaciones con susceptibilidad al desarrollo de sepsis, agravamiento o muerte.Materiales y métodos: se evaluaron 232 adultos no emparentados: 111 pacientes con sepsis y con menos de 48 horas de evolución y 121 sujetos sanos (grupo control). Se registraron: APACHE II y SOFA al ingreso, sexo, edad, sitio de infección, microorganismo aislado, comorbilidades, tiempo de estadía en UTI, grado de severidad (sepsis, sepsis moderada o shock séptico) y desenlace (sobrevida o muerte). Se puso a punto un ELISA de doble captura. Se analizaron 4 SNPs en el gen de la ADNasa I: R-21S y Q222R por PCR-RFLP; y Y95S y R105G por secuenciación.Resultados: El 40,5% de los pacientes sépticos tuvo un desenlace fatal, la mayoría con shock séptico (63,3 vs. 26,4 %), con índices significativamente mayores de SOFA (8 vs. 4) y APACHE II (18 vs. 12) y un tiempo de internación significativamente menor (6 vs. 10 días) respecto de los pacientes con desenlace favorable (p0,05) entre los niveles de NETs y las variables clínicas registradas.De los SNPs estudiados en el gen de la ADNasa I, sólo el Q222R resultó polimórfico (prevalencia >1%). Al comparar sus distribuciones genotípicas, se observaron diferencias significativas (p=0,014) entre pacientes con sepsis (A/A: 15,4%, A/G: 39,6%, G/G: 45,0%) y controles (A/A: 5,0%, A/G: 47,1 %, G/G: 47,9%). Se obtuvo para el genotipo AA (mayor actividad enzimática) un Odds ratio: 3,376 (1,279-8,908) para la predicción del desarrollo de sepsis (modelo de herencia recesivo). No se encontró asociación (p>0.05) entre las variables clínicas estudiadas y los polimorfismos analizados.Conclusiones: Los pacientes con sepsis presentaron mayores niveles de NETs que los controles, aunque estos niveles no correlacionaron con variables de agravamiento o muerte.Tener el genotipo AA para el polimorfismo Q222R de la ADNasa I humana aumentaría más de tres veces la posibilidad del desarrollo de sepsis. La mayor actividad enzimática del genotipo AA provocaría una degradación anticipada de NETs, limitando la capacidad del individuo en resolver la infección inicial.Estos son los primeros datos mundiales acerca de polimorfismos en la ADNasa I y sepsis, y abriría futuras líneas de investigación en potenciales objetivos terapéuticos.