BLS INDUCE LA PRESENTACIÓN CRUZADA DE PÉPTIDOS, GENERANDO UNA RÁPIDA ACTIVACIÓN Y EXPANSIÓN DE LINFOCITOS CD8+ IN VIVO

BERGUER, P; MUNDIÑANO ,J; PIAZZON, I; GOLDBAUM, F

Mar del Plata

Congreso; Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) LII REUNION CIENTIFICA ANUAL Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica LII REUNION CIENTIFICA ANUAL Sociedad Argentina de Inmunología (SAI) LV REUNION Sociedad Argentina de Fisiología

La lumazina sintetasa de Brucella spp. (BLS) es una proteína decamérica altamente inmunogénica. Su estructura permite la inserción de péptidos en sus 10 extremos N-terminales y estas quimeras generan inmunidad oral y sistémica sin adyuvantes. Demostramos que activa células dendríticas in vitro e induce su reclutamiento in vivo, siendo estos efectos dependientes de TLR4. En este trabajo investigamos la capacidad de BLS de inducir la presentación cruzada de un péptido de ovoalbúmina (OVA), inmunizando con la quimera BLS-OVA257-264. Se inocularon ratones C57Bl/6J vía iv con células CD8+ de ganglios de ratones transgénicos OT-I, purificadas por MACS y marcadas con CFSE. Estos linfocitos reconocen al péptido 257-264 de OVA en el contexto de MHCI. La inmunización sc con BLS-OVA257-264 indujo la proliferación de las células OT-I en los ganglios drenantes a las 20hs post-inoculación, demostrada por FACS por la disminución en la media de la intensidad de fluorescencia (MFI) de CFSE. Los datos se expresan como la MFI de CFSE±SD (BLS-OVA257-264: 535±97, PBS:1060±43;p<0.01). El porcentaje de linfocitos OT-I que expresaron el marcador de activación temprana CD69 aumentó significativamente a las 20hs (BLS-OVA257-264: 72±3.8, PBS:15.7±1.6;p<0.01). A los 5 días, la proliferación de las células OT-I continuó siendo muy intensa (p<0.0001). Además, se produjeron aumentos significativos de células OT-I activadas, representadas por linfocitos con altos niveles de CD44, en los ratones inoculados con la quimera. Los datos se expresan como la MFI de CD44 en células CFSE+ (BLS-OVA257-264:2385±365, PBS:1295±258; p<0.03). Los resultados indican que la asociación de péptidos a BLS induce su presentación cruzada, generando la activación y proliferación de linfocitos CD8+ específicos. A diferencia de otras vacunas basadas en subunidades, las quimeras de BLS resultan sumamente eficientes para la rápida activación de linfocitos CD8+.