Evaluación de focos nucleares (gamma h2ax) en células irradiadas con protones y iones de litio

BRACALENTE, C; MAGLIOCO, A; MOLINARI, B; PALMIERI, M; DURAN, H; IBAÑEZ, I; KREINER A; BURLÓN A; VALDA A; DAVIDSON J; DAVIDSON M; VAZQUEZ M; OZAFRAN M; MUHLMANN M

Mar del Plata

Congreso; 52° Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica - 55° Reunión científica de la Sociedad Argentina de Inmunología- Sociedad Argentina de Fisiologia; 2007

SAIC-SAI-SAFIS

Las propiedades especiales tanto físicas como biológicas de la radiación con partículas de alto LET (transferencia lineal de energía) han llevado a su utilización creciente en terapia para el cáncer. En este trabajo se comparó el efecto de radiaciones de bajo y alto LET sobre líneas celulares con distinta radiosensibilidad (Irs-20 y CHO-10B2) cuantificando el número y tamaño de los focos nucleares que se forman a partir de la fosforilación de la histona H2AX (γH2AX), la cual interviene en la reparación del daño al ADN.La detección de los focos se realizó por métodos inmunocitoquímicos y microscopía de fluorescencia. Los cultivos celulares se irradiaron con protones en fase plateau (14 MeV, LET:3 keV/μ), en pico de Bragg (3 MeV, LET:14 keV/μ) y con iones de Li (7 MeV, LET:250 keV/μ) en el acelerador Tandar, CNEA.Se realizó el estudio clonogénico de las dos líneas celulares. La irradiación con protones (bajo LET) mostró una diferencia significativa (P<0,05) en las curvas de sobrevida entre las líneas celulares indicando la disímil radiosensibilidad de ambas. Por el contrario la irradiación con Li (alto LET) presentó un patrón de respuesta similar para ambas líneas por inhibición de los mecanismos de reparación. El análisis de la γH2AX se realizó luego de la irradiación con protones y Li. Los datos mostraron un aumento significativo (P<0,05) en el número de focos/núcleo en función de la dosis recibida para todas las condiciones de irradiación. El tamaño de los focos nucleares aumentó considerablemente en las células irradiadas con iones de Li comparados con los generados por protones, evidenciando el daño densamente localizado inducido por partículas de alto LET.La formación de focos nucleares mediada por la γH2AX en células irradiadas con haces de partículas con diferentes características permitió analizar la magnitud del daño, la reparación de las DSBs y detectar la generación de focos nucleares de mayor tamaño inducidos por partículas de alto LET.