IMEX   05356
INSTITUTO DE MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
CUANTIFICACION DEL REORDENAMIENTO MOLECULAR P230 BCR-ABL1 EN LEUCEMIA MIELOIDE CRONICA.
Autor/es:
CRISTIAN FERRI; BIANCHINI M; NORIEGA MF; GONZALEZ MS; BENGIÓ RM; MOIRAGHI EB; LARRIPA IB
Lugar:
Buenos AIres
Reunión:
Congreso; XII CONGRESO NACIONAL BIOQUIMICO. CONFEDERACION UNIFICADA BIOQUIMICA DE LA REPUBLICA ARGENTINA. 70 CONGRESO ARGENTINO DE BIOQUIMICA. ASOC. BIOQ. ARG (CUBRA-ABA); 2013
Institución organizadora:
ABA
Resumen:
La Leucemia Mieloide Crónica (LMC), se caracteriza por presentar el cromosoma Philadelphia (Ph). Los reordenamientos moleculares más frecuentes son e1a2, b2a2/b3a2 que codifican las proteínas de fusión de 190 kDa y de 210 kDa respectivamente. La isoforma e19a2 codifica para una proteína de 230kDa y suele asociarse a LMC neutrofílica. Generalmente presenta un curso clínico benigno a menos que presente anomalías cromosómicas adicionales. En la LMC la velocidad y profundidad con que se alcanza la respuesta molecular se asocian al pronóstico del paciente. La reducción de ≥ 3 logaritmos de los transcriptos BCR-ABL1 (correspondiente a 0,1% en la escala internacional) se denomina respuesta molecular mayor, que es un objetivo primario de la terapia. Sin embargo, debido a la baja frecuencia de casos portadores de la isoforma e19a2 no están disponibles kits y/o estándares comerciales para tipificar y/o cuantificar dicho rearreglo, comprometiendo el diagnostico y seguimiento del paciente. El objetivo del presente trabajo fue estandarizar la RT-qPCR para cuantificar dicho rearreglo a fin de evaluar la respuesta al tratamiento de pacientes con LMC P230BCR-ABL1. A partir de la muestra de un paciente Ph+ resistente a la terapia se identificó la isoforma e19a2 por PCR cualitativa multiplex. Este reordenamiento fue clonado en Escherichia coli mediante un constructo plasmídico, con el objeto de generar el control positivo para la curva estándar. Luego del ajuste de la RT-qPCR se cuantificó en muestras secuenciales del mismo paciente los niveles de BCR-ABL1, mostrando en todas las determinaciones una respuesta molecular mínima. El análisis mutacional del domino kinasa del ABL1 reveló la presencia de la mutación T315I en todas las muestras analizadas. La correcta caracterización y cuantificación molecular a través del desarrollo de este método posibilitó el monitoreo molecular y mutacional de este paciente permitiendo la toma de una conducta terapéutica acorde al genotipo identificado.