RESISTENCIA ADQUIRIDA AL TRATAMIENTO EN PACIENTES CON LEUCEMIA MIELOIDE CRONICA (LMC): DETECCION MOLECULAR DE MUTACIONES

NORIEGA F; FERRI C; ICARDI G; MEDINA M; BENGIO R; LARRIPA I.

Buenos Aires

Congreso; XII CONGRESO NACIONAL BIOQUÍMICO. CONFEDERACIÓN UNIFICADA BIOQUÍMICA DE LA REPÚBLICA ARGENTINA. 70º CONGRESO ARGENTINO DE BIOQUÍMICA. ASOC. BIOQ. ARG (CUBRA-ABA); 2013

ABA

El uso de Inhibidores de Tirosina Kinasa (ITK) ha llevado al desarrollo de resistencia secundaria al tratamiento. Una de las causas mas frecuentes es la presencia de mutaciones en el dominio kinasa (DK) del gen ABL1. Objetivo: Evaluar la presencia de mutaciones y su correlaci¨®n con los niveles de BCR-ABL1 en pacientes con falta y/o p¨¦rdida de la respuesta hematol¨®gica y/o citogen¨¦tica al tratamiento. Metodolog¨ªa: Se evaluaron 81 pacientes en diferentes fases de la enfermedad. Por QRT-PCR (PCR cuantitativa) se determin¨® la cantidad de transcriptos BCR-ABL1. El screening de mutaciones se realiz¨® por High Resolution Melting (HRM) y la identificaci¨®n de las mismas por Secuenciaci¨®n Directa. Resultados y Discusi¨®n: Se identificaron 20/81 pacientes con mutaciones: 5 en tratamiento con Imatinib, 14 con Dasatinib y 1 con Nilotinib. Todos  presentaron un perfil de HRM compatible con un cambio nucleot¨ªdico. Por Secuenciaci¨®n Directa se detectaron 18 casos con mutaciones con nivel de transcriptos BCR-ABL1 ¡Ý 1 % lo que indicar¨ªa que la resistencia podr¨ªa deberse a la presencia de las mutaciones. Los 2 casos negativos fueron evaluados por HRM/PCR-ASO evidenciando la presencia de las mutaciones V299L  y F359V en baja proporci¨®n. La incidencia de las mutaciones coincidi¨® con los datos de la literatura, excepto por las mutaciones L324M, E255Q, A337V y R386G las cuales son un hallazgo de nuestro laboratorio. Conclusiones: La utilizaci¨®n de las t¨¦cnicas HRM/PCR-ASO aument¨® la sensibilidad de detecci¨®n de los clones mutados. La correlaci¨®n de los niveles de transcriptos BCR-ABL1 totales respecto de los mutados permitir¨ªa definir el grado de responsabilidad de la mutaci¨®n en la resistencia. Nuestro trabajo contribuye al mejor conocimiento de las mutaciones en el gen ABL1 en nuestra poblaci¨®n de pacientes con LMC tratados con ITKs lo cual, tiene por finalidad, mejorar la estrategia terap¨¦utica a seguir.