Regulación de marcadores de maduración y citoquinas proinflamatorias por activación muscarínica. Participación de ON

LOMBARDI, GABRIELA; SALAMONE GABRIELA; GORI SOLEDAD; YUSEFF, FERNANDA; GEFFNER JORGE; SALES, MARIA ELENA

Buenos Aires

Congreso; I taller de Inmunidad Innata; 2012

Academia Nacional de Medicina

El sistema colinérgico neuronal está constituído por la acetilcolina (Ac), las enzimas colina-acetiltransferasa (CAT) y la acetilcolinesterasa (ACE) y por los receptores nicotínicos y muscarínicos (M). Hemos demostrado previamente que las células dendríticas (CD) humanas expresan los subtipos M3, M4 y M5 y las enzimas CAT y ACE. La vías de señalización de los receptores M3 y M5 están involucradas en la activación de la óxido nítrico sintasas (NOS), y se sabe que el óxido nítrico (ON) derivado de estas es un regulador de la respuesta inmune. Teniendo en cuenta que la maduración de las CD es un paso central en el establecimiento de una respuesta inmune efectiva investigamos el efecto de la estimulación colinérgica tanto sobre la expresión de los marcadores de maduración como la producción de citoquinas proinflamatorias en estas células.  Las CD se diferenciaron a partir de monocitos CD14+ aislados de sangre periférica de dadores sanos y cultivaron durante 5 días con IL-4 y GM-CSF. Posteriormente, fueron tratadas durante 1 hora con el agonista colinérgico carbacol (Carb, 10-8M) y cultivadas 24 horas adicionales en ausencia (CD inmaduras (CDi)) o presencia (CD maduras (CDm)) de LPS (0.5 mg / ml). El Carb incrementó la expresión de HLA-DR y CD86, y la producción de  IL-12 (pg/ml) (Carb: 575 ± 10; basal: 374 ± 15) y TNF-α (pg/ml) (Carb:6733±1167; basal: 3667±629) solo en las CDm (n=3, P ≤ 0.01 vs. basal). Ambos efectos se revirtieron en presencia del antagonista muscarínico atropina (10-7M). La adición de muscarina (10-8M) incremento significativamente la producción de ON en las CDm (678±123, P