Estudio de los efectos de la tolerancia al lipopolisacárido (LPS) sobre los neutrófilos (PMN) periféricos

MARÍA FLORENCIA LÓPEZ; MARÍA V. RAMOS; VERÓNICA LANDONI; ROMINA J. FERNÁNDEZ-BRANDO; LETICIA V. BENTANCOR; BÁRBARA REARTE; MARTÍN A. ISTURIZ; MARINA S. PALERMO; GABRIELA C. FERNÁNDEZ

Mar del Plata

Congreso; LI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), LIV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2006

La tolerancia al LPS consiste en una hiporespuesta asociada a una incapacidad de los macrófagos de producir citoquinas, y es causada por la exposición a dosis bajas y repetidas de esta misma molécula. Aquí investigamos los efectos de la tolerancia al LPS sobre los PMN. Para ello, ratones recibieron 4 dosis diarias de 5 μg/ratón LPS (0, 24,48 y 72h, tol, n=12) o salina (norm, n=12), y luego ambos grupos fueron desafiados con 100 μg/ratón de LPS (tol des y norm des). El número de PMN en periferia justo antes y 2h después de cada inoculación se determinó por recuento diferencial y la expresión de la molécula de adhesión CD11b por citometría de flujo. Los ratones normales presentaron un aumento del número de PMN luego de cada inyección con salina asociado al estrés de la inoculación. Luego de 2h de la 1º dosis de LPS el número de PMN disminuyó, con un posterior rebote (neutrofilia) 24h más tarde. Luego de la 2º dosis de LPS (26h) también se observó neutropenia y posterior neutrofilia, pero las posteriores dosis no provocaron variaciones en el número de PMN (PMN/mm³: 0h: norm=1019±146, tol=1231±141; 2h: norm=2341±369, tol=350±159*; 24h: norm=1275±242, tol=2720±511*; 26h: norm=2465±496, tol=1045±156*; 48h: norm=1342±241, tol=2175±539*; 50h: norm=2133±305, tol=1850±391; 72h: norm=1096±139, tol=1292±152; 74h: norm=1975±325, tol=1053±145; *p<0.05 vs norm). El desafío con LPS provocó neutropenia en los animales normales pero no en los tolerantes (PMN/mm3: norm des=435±101, tol des=1069±208#, #p<0.05 vs norm des). En los tolerantes la expresión del CD11b en los PMN resultó menor a la de los normales (intensidad media de fluorescencia (IMF): norm=316±16, tol=189±22*,*p<0.05 vs norm). Luego del desafío, la expresión del CD11b aumentó 2.5 veces en los animales normales y sólo 1.6 veces en los tolerantes (norm des=798±134*, tol des=305±24†#, *p<0.05 vs norm, †p<0.05 vs tol, #p<0.05 vs norm des). En un experimento preliminar observamos que el desafío con LPS indujo un estallido respiratorio menor en los animales tolerantes respecto al observado en los normales. El fenómeno de tolerancia al LPS no sólo afecta a los macrófagos, sino también a los PMN.