EFECTO DE LA INTOXICACIÓN AGUDA POR PARACETAMOL (AP) SOBRE LA EXPRESIÓN Y LOCALIZACIÓN SUBCELULAR HEPÁTICA DE LA GLICERALDEHIDO 3 FOSFODESHIDROGENASA (GAPDH) EN RATAS.

DELFANTE AE; DICARLO MB; PERAZZO JC; MOTTINO AD; GHANEM CI

Mar del Plata

Congreso; 56 Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2011

Sociedad Argentina de Investigación clínica.

Introducción: La intoxicación por AP produce principalmente necrosis centrolobullillar hepática, aunque también se observa apoptosis, sin embargo su contribución a la intoxicación es discutido. La enzima glicolítica GAPDH, muy usada como housekeeping gene se relacionó recientemente con diferentes funciones (Ej. apoptosis, reparación y preservación del ADN) según su localización subcelular. El objetivo del presente trabajo fue evaluar si la intoxicación aguda por AP modifica los niveles y la redistribución subcelular de GAPDH en ratas. Métodos: Se usaron dos grupos de ratas Wistar machos. AP: recibieron una dosis única de AP (1g/Kg, i.p). Control (C): recibieron solo vehículo. A las 24 h se midió ASAT en plasma y se realizaron estudios histopatologícos. Se estudio la expresión hepática del RNAm y la proteína  de GAPDH por Northern y Western blot en homogenado total. Luego se determino su concentración subcelular en fracciones nuclear, mitocondrial y citoplasmática obtenidas mediante centrifugación diferencial. Los resultados se expresaron como media±DS y se analizaron por Student t test (* p<0.05 vs C) Resultados: El AP incrementó en 3,5* veces los niveles de ASAT y la necrosis hepatica se confirmó por histología. El ARNm de GAPDH se incrementó en AP vs C (AP: 246±30*; C: 100±36). La cantidad de proteína también aumento en el homogenado total de AP (AP: 292±127*; C: 100±7). Cuando se estudiaron las fracciones subcelulares se observo un aumneto de GAPDH intranuclear en el grupo AP (232±95*; C: 100±49) sin observarse diferencias en el compartimiento mitocondria y en el citosol. Conclusiones: La intoxicación aguda por AP induce la expresión proteica de GAPDH por un mecanismo transcripcional. Esta inducción se relaciona con un incremento en la translocación intracelular de la proteína al núcleo, pudiendo estar asociado con procesos pro-apoptoticos. Otra conclusión importante es que estos resultados cuestionan fuertemente el uso de GAPDH como Housekeeping gene.