IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
informe técnico
Título:
Informe Técnico de Avance 1 PICT 2007 #07-939
Autor/es:
NOVARO VIRGINIA
Fecha inicio/fin:
2009-06-19/2012-06-19
Páginas:
1-8
Naturaleza de la

Producción Tecnológica:
Biológica
Campo de Aplicación:
Salud humana
Descripción:
Hemos utilizado un modelo experimental en el que la administración continua de acetato de medroxiprogesterona (MPA) induce carcinomas mamarios en ratones hembra de la cepa BALB/c. Este modelo reproduce varios aspectos de la patología en humanos, ya que la mayoría de los tumores mamarios son de tipo ductal, metastático, expresan altos niveles de receptores de estrógeno (ER) y progesterona (PR) y transitan por distintos estadíos de respuesta hormonal. En este sentido, nos focalizamos en estudiar la variante tumoral hormono-dependiente (C4-HD) que crece en respuesta al progestágeno y la variante tumoral hormono-independiente (C4-HI) que surge espontáneamente a partir de la primera, sin embargo, ya no necesita del MPA para crecer. Sabiendo por trabajos previos del laboratorio que la vía de PI3K/AKT es fundamental para la regulación de la expresión de ER y PR hemos demostrado que la activación de esta vía pero no de la vía MEK/ERK1/2 es fundamental para el crecimiento de la variante tumoral C4-HI, pero no así de la variante C4-HD. Además, sabiendo que factores liberados por fibroblastos asociados a carcinomas HI (CAF-HI) activan al PR en ausencia del progestágeno, estudiamos el rol de factores estromales en la activación de la vía PI3K/AKT y la participación de esta vía en la adquisición de hormono-independencia. Los resultados obtenidos hasta el momento indican que la activación diferencial de PI3K/AKT es dependiente del contexto celular, ya que en cultivos celulares tridimensionales que mantienen interacciones célula-célula logramos reproducir las diferencias entre las variantes tumorales observados in vivo. Además, encontramos que señales provenientes de fibroblastos presentes en el estroma de tumores C4-HI, en particular el FGF-2, participarían en la activación diferencial de la vía PI3K/AKT en dichos tumores. Para analizar la participación de la vía del AKT en la adquisición de hormono-independencia, a partir de células tumorales generamos variantes con distinto grado de activación de la vía de AKT y evaluamos la capacidad de inducir tumores de cada variante. Observamos que ratones inoculados con células C4-HD y C4-HI modificadas genéticamente para sobreactivar la vía del AKT por expresión de una variante miristoilada de AKT1 (myrAkt), generaron tumores con una tasa de crecimiento mayor a la de células C4-HD y C4-HI infectadas con el vector retroviral vacío (control). En este mismo sentido, los tumores generados a partir de células que sobreexpresan PTEN, inhibidor de la activación de AKT, presentaron una tasa de crecimiento menor al control. Además, el análisis morfológico de los tumores generados con células C4-HD que sobreexpresan la vía del AKT mostró mayor infiltración de tejido conectivo y una estructura glandular diferenciada, típica de los tumores C4-HI. Para estudiar el grado de respuesta hormonal de los tumores generados con células que sobreactivaron AKT1, agregamos a los animales un pellet de antiprogestágeno RU486. En un resultado preliminar, obtuvimos una regresión tumoral total en el grupo animal portador de las células infectadas con el vector vacío, mientras que en el grupo de animales inoculados con células infectadas con myrAKT  la regresión tumoral no fue completa. Estos resultados, indican que la activación de la vía de AKT, a partir de señales parácrinas del tejido tumoral, puede modificar el comportamiento y respuesta hormonal de los tumores mamarios.