Los agonistas inversos del receptor H2 a histamina pueden activar otras vias de señalización independiente de la modulación de segundos mensajeros

ALONSO N; GOTTARDO F; SHAYO C; DAVIO C; FERNANDEZ N

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLII Reunión de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2010

SAIC

Los ligandos de los receptores acoplados a proteína G (GPCRs) fueron originalmente clasificados en agonistas, antagonistas y agonistas inversos de acuerdo a su eficacia en la modulación de segundos mensajeros. Actualmente se sabe que los GPCRs también pueden modular una amplia variedad de procesos autoregulatorios de corte de señal así como de señalizar a través de miembros de la familia de las MAPK en forma independiente de segundos mensajeros. En base a esto, el objetivo del presente trabajo es evaluar si aquellos ligandos clasificados como agonistas inversos del receptor H2 a histamina (rH2) en base a la modulación de AMPc pueden regular la actividad de ERK1/2. Mediante ensayos de concentración-respuesta realizados en células HEK293T transfectadas con el rH2 observamos que los ligandos: cimetidina famotidina, tiotidina y ranitidina disminuyen los niveles basales de AMPc, comportándose efectivamente como agonistas inversos. Al evaluar los niveles de pERK1/2 mediante western blot, a distintos tiempos de tratamiento con dichos ligandos, observamos que sólo ranitidina y tiotidina provocan un incremento a los 10 min en la fosforilación de ERK, a pesar de que los 4 ligandos ensayados disminuyen en forma similar los niveles de AMPc. Por otro lado, ensayos de unión mostraron una disminución en la cantidad de sitios receptores en la membrana plasmática luego del tratamiento con ranitidina y tiotidina (50% n=3, p<0,05) en forma similar a lo observado con el agonista, mientras que cimetidina y famotidina no conducen a la internalización del rH2. Resultados similares fueron obtenidos al evaluar la localización delrH2YFP mediante microscopia confocal. En base a estos resultados podemos concluir que de los agonistas inversos estudiados, ranitidina y tiotidina promueven la internalización del rH2 y regulan los niveles de pERK en forma independiente a la modulación de AMPc, mostrando un perfil farmacológico novedoso e importante llegado el momento de su prescripción clínica.