MECANISMO MOLECULAR DE INTERNALIZACION CRUZADA ENTRE LOS RECEPTORES H1 Y H2 DE HISTAMINA

ALONSO N; NOTCOVICH C; FERNANDEZ N; DAVIO C; SHAYO C

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLII Reunión de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2010

SAIC

Los receptores a histamina pertenecen a la familia de receptores acoplados a proteína G (GPCRs). El receptor H1 (rH1) modula la producción de IPs, mientras que el receptor H2 (rH2) regula los niveles de AMPc. Estudios previos de nuestro laboratorio indican que dichos receptores poseen la capacidad de cointernalizar ante el estímulo con ligandos agonistas como parte de la regulación cruzada que existe entre ellos. Dado que en otros sistemas ha sido descripto que la internalización del rH1 es dependiente de caveolina, mientras que la del rH2 es dependiente de clatrina, el objetivo de este trabajo es evaluar el mecanismo de cointernalización de los rH1 y rH2 en células CHO transfectadas con ambos receptores (CHOH1-H2). Al evaluar mediante ensayos de unión el número de sitios receptores de membrana luego de 1 h de tratamiento con los agonistas específicos (2, 3-trifluormetilfenilhistamina para el rH1 y amthamina para el rH2), observamos que en este sistema la internalización del rH1 estimulada por el agonista H1 es bloqueada en un 100% por filipin (inhibidor de la endocitosis mediada por caveolina). Sorprendentemente este inhibidor también bloqueo en un 95% la internalización del rH2 estimulada por el agonista H1. Por otro lado, al evaluar la internalización de los receptores en presencia de una construcción dominante negativa de EPS15, proteína necesaria para la internalización mediada por clatrina, observamos un bloqueo del 75% de la endocitosis del rH2 estimulada por el agonista H2 y una inhibición del 100% en la cointernalización del rH1 inducida por el mismo ligando. Por lo tanto estos resultados indican que el mecanismo de cointernalización de los receptores H1 y H2 a histamina en células CHOH1-H2, no depende del tipo de receptor sino del estimulo aplicado, siendo dependiente de caveolina en caso de ser inducida por agonistas H1 y dependiente de clatrina en caso de ser inducida por agonistas H2.