NUEVAS EVIDENCIAS DEL EFECTO DEL OLIGODEOXINUCLEÓTIDO IMT504 SOBRE CÉLULAS BETA MURINAS (MIN6B1)

BIANCHI MS; LIBERTUN C; MONTANER A; BONAVENTURA M M; CONVERTI A; LUX-LANTOS V

caba

Congreso; Jornadas anuales SAB; 2020

soc arg de biologia

Hemos demostrado previamente que el tratamiento con IMT504 promueve mejoras significativas en la condición diabética de diversos modelos animales. También se han demostrado efectos in vivo en la expresión de genes en islotes frescos aislados de animales diabéticos tratados con IMT504 y efectos in vitro en la activación enzimática y la expresión de genes en células beta murinas (MIN6B1) tratadas con IMT504. Basados en estos resultados, aquí evaluamos efectos protectores frente a la apoptosis y expresión de PDX1 como indicador de funcionalidad de las células beta por acción del IMT504. Paralelamente comenzamos a investigar los posibles sitios de unión y acción del IMT504 en estas células. Se utilizó una línea de células beta murinas (MIN6B1). Éstas fueron crecidas en DMEM suplementado con 20 mM glucosa, 15% SFB y 71 µM β-mercaptoetanol. Se analizó apoptosis mediante ELISA, Pdx-1 por Western Blot, y la localización del IMT504 por ICQ con IMT504 marcado con TexasRed. La apoptosis fue inducida por incubación con 0,75 mM de H2O2 por 12 hs, luego las células se trataron con IMT504 [0, 2 (IMT2), 4 (IMT4) y 8 µg/ml (IMT8)] por 24 hs. La muerte celular inducida por H2O2 fue revertida en forma dosis dependiente, alcanzando niveles similares al Control mediante el tratamiento con IMT8 [ANOVA con medidas repetidas: p