Activación rápida y transitoria de MAPKS como mediador del efecto de la progestina R5020 sobre la proliferación celular y la expresión génica en células de adenocarcinoma de endometrio humano

LA GRECA A; VALLEJO G; BALLARÉ C; BEATO M; SARAGÜETA P

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LV Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

En los últimos años se han propuesto mecanismos que involucran la activación de cascadas de señalización citoplasmáticas en respuesta a progesterona en diferentes tejidos. Con el objetivo de caracterizar estos mecanismos y la respuesta tejido específico al Receptor de Progesterona (RP) en endometrio, estudiamos la conexión entre la proliferación celular, la expresión génica, la activación de las vías de señalización citoplasmáticas, ERK1-2 y Akt, y su regulación por estradiol (E2) y progesterona (Pg) en la línea celular de cáncer de endometrio humano, Ishikawa. El tratamiento con E2 por 48hs aumentó el número de células, mientras que los tratamientos con R5020 o R5020 y E2 no los modificaron significativamente. Sin embargo, R5020 aumentó el número de células BrdU positivas del 23 al 71% al cabo de 18 hs de tratamiento, mientras que E2 aumentó del 20 al 60% a las 36hs de estimulación. R5020 y E2 en combinación inhibieron el efecto proliferativo de E2. La presencia de los antagonistas ICI y RU486 inhibió los efectos de E2 o E2 y R5020, respectivamente. Se evaluó la expresión de RP y pS2 -genes blanco del receptor de E2- y de Mig- 6 y Dusp1 -genes blanco del receptor de Pg- a las 6hs de tratamiento con E2, R5020 o R5020 y E2, y comparó con la expresión obtenida en la línea celular de cáncer de mama, T47D. RP y pS2 resultaron positivamente regulados por E2, y Mig-6 y Dusp1 por R5020 respectivamente. Los niveles de las formas activas de las quinasas citoplasmáticas ERK1-2 y Akt se medieron mediante western blot.  pERK1-2 aumentó a los 5min decayendo hacia los 10min de tratamiento con R5020. El tratamiento con RU486 y el inhibidor de la vía de las MAPK, PD 98059, inhibió dicho aumento. No se registraron cambios en la forma activa de Akt. Los resultados sugieren que Pg podría actuar como estímulo proliferativo en esta línea celular y que la rápida y transitoria activación de ERK1-2, pero no así la de Akt, regula la expresión génica de Mig-6 y Dusp1 mediada por el RP.