Caracterización de la actividad mitocondrial durante la capacitación espermática murina Characterization of mitochondrial activity during murine sperm capacitation

GÓMEZ ELÍAS MD; COHEN DJ; GIACCAGLI M.M; CUASNICU PS; MARÍN-BRIGGILER CI; DA ROS, VG

Congreso; XXXI Reunion anual virtual Sociedad Chilena De Reproduccion Y Desarrollo; 2020

Los espermatozoides de los mamíferos requieren transcurrir un tiempo en el tracto reproductivo femenino para adquirir la capacidad de fertilizar al ovocito. Dicho proceso denominado capacitación implica una serie de cambios estructurales y funcionales en los espermatozoides. Estos cambios requieren un adecuado aporte energético y una fina administración del mismo. Sin embargo, las fuentes de energía y los mecanismos de regulación no son del todo comprendidos. Basándonos en esto, el objetivo de este estudio fue determinar la relevancia de la actividad mitocondrial en la capacitación espermática murina. Para ello, evaluamos los cambios en el potencial de membrana mitocondrial (MMP) en espermatozoides vivos durante la capacitación mediante citometría de flujo utilizando la sonda TMRE y observamos que el porcentaje de células con MMP alto aumentó durante la capacitación. Al incubar a los espermatozoides con concentraciones crecientes del desacoplante mitocondrial CCCP durante la capacitación, hubo una disminución no solo en el porcentaje de células con alto MMP sino también en la intensidad de la fluorescencia promedio de los espermatozoides con alto MMP en comparación con el grupo control. Luego, evaluamos la necesidad de la capacitación para el aumento de MMP mediante la inhibición de PKA, molécula crítica para dicho proceso, no observando el aumento en el porcentaje de espermatozoides con alto MMP característico de la capacitación. Posteriormente, evaluamos la motilidad y el MMP mediante microscopía de fluorescencia y observamos que mientras los espermatozoides mótiles exhibían un MMP alto, las células con un MMP bajo eran inmótiles. Además, el tratamiento con CCCP produjo una disminución de la motilidad y de la hiperactividad medida por CASA. En resumen, mostramos, por primera vez, que MMP aumenta durante la capacitación espermática murina y que la actividad mitocondrial podría estar asociada con el mantenimiento de la motilidad durante este proceso.Este trabajo fue apoyado por la Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica (ANPCyT) PICT 2015-555 y PICT 2017-668 a VGD y DJC, y CONICET a MMG.