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En un estudio previo se han estimado las frecuencias de las 10 mutaciones más frecuentes de la deficiencia de la 21-hidroxilasa en 356 afectados, detectando 85-95% de los alelos clásicos (C) y alrededor del 70% de los no clásicos (NC). El objetivo de este trabajo fue estudiar la presencia de mutaciones noveles o menos frecuentes como causantes de la patología. Para ello, se secuenciaron las regiones codificantes y promotoras cercanas del gen CYP21A2 en una muestra de 19 pacientes (1 C y 18 NC) que no habían sido completamente genotipificados previamente. A partir de ADN de linfocitos de sangre periférica, el gen fue amplificado por PCR, en forma diferencial del pseudogen, en 4 fragmentos y los productos analizados por secuenciación automática. Los resultados obtenidos fueron comparados mediante programas de bioinformática con bases de datos para el genoma humano. En 5/19 pacientes se hallaron 6 mutaciones, 4 previamente descriptas: p.R443X, p.R478L, p.R483W y c.delG_2672; una mutación novel hallada anteriormente en otro paciente de nuestra cohorte -M por V en el exón 7- y una mutación novel que predice un cambio R por C en el exón 3. Para 2/5 pacientes, se comprobó la segregación alélica mediante el estudio de los ADNs parentales. Asimismo, se detectaron 5 variantes noveles en el promotor en 4 pacientes NC: g.T>C -195, g.C>G -211, g.A>G -223, g.C>G -261 y g.A>G -296, cuya posible implicancia biológica resta aún determinar. Las variantes p.K101R, p.S269T y pN493S descriptas como polimorfismos, se hallaron en 14, 2 y 11 pacientes, respectivamente. El genotipo se ha completado en 4 pacientes: 1C y 3 NC. En 8 pacientes, sólo un alelo presenta mutación, 3 de los cuales poseen además una de las variantes noveles en el promotor. Para aquellos pacientes en que no se hallaron las 2 mutaciones es necesario investigar otras causas genéticas que pudieran explicar su fenotipo.