Expresión de cadherina epitelial y moléculas relacionadas en las líneas celulares de cáncer de mama humano IBH-6 e IBH-4

LAPYCKYJ, L.; MATOS, M.L.; CASTILLO, L.F.; GABRIELLI, N.M.; LUTHY, I.A.; VAZQUEZ-LEVIN, M.H.

Instituto de Oncología Angel Roffo

Congreso; XXV Jornadas Aniversario Instituto Roffo; 2009

Instituto de Oncologia Angel Roffo

Introducción: La cadherina epitelial (Ecad) es una molécula de adhesión de 120 KDa que participa en las uniones adherentes de células epiteliales. Se conecta al citoesqueleto de actina a través de proteínas adaptadoras, entre ellas b-catenina. La pérdida de expresión/función de Ecad ha sido relacionada con la progresión tumoral y con la metástasis en numerosos tejidos, entre ellos mama. Varias moléculas se asocian a alteraciones en Ecad (ej. cadherina neural (Ncad), disadherina y Twist). Objetivo: Evaluar la expresión de Ecad y moléculas asociadas en las líneas celulares de cáncer de mama IBH-6 e IBH-4. Estas líneas fueron desarrolladas a partir de tumores humanos primarios ductales y muestran características típicas de células epiteliales malignas. Métodos: La presencia y localización de Ecad, b-catenina y F-actina fueron analizadas usando microscopía confocal. Las formas proteicas fueron identificadas por “Western immunoblotting”. La integridad y niveles del ARNm de Ecad y del gen codificante CDH1 fueron evaluados por PCR. La expresión de Ncad, disadherina y Twist fue también evaluada. Las células MCF-7 fueron empleadas como control. Resultados: En extractos proteicos de células IBH-6 e IBH-4 se identificó sólo una forma de Ecad de 89 KDa, truncada en el extremo C-terminal y presente en niveles menores (<30%) que los encontrados para la forma de 120 KDa en células MCF-7. No se detectó acumulación del ectodominio (86 KDa) o del fragmento CTF1 (38 KDa) de Ecad. Las células IBH-6 e IBH-4 mostraron localización intracelular puntillada de Ecad, diferente de la observada en la membrana de células MCF-7. b-catenina acompañó a Ecad. Se identificaron fibras de estrés de actina en células IBH-6 e IBH-4. Se detectaron niveles de transcripto de Ecad aprox. 1000 veces menores que en MCF-7. La secuencia del ARNm de Ecad codificante de los exones 14-16 no pudo ser amplificada por RT-PCR anidada en las líneas IBH-6 e IBH-4. El análisis del ADN genómico sugiere la presencia de alteraciones en el gen CDH1. No se detectó la expresión del transcripto o la proteína de Ncad y disadherina en las células en estudio. El transcripto de Twist se encontró en niveles aumentados en ambos tipos celulares. Conclusiones: Las células de cáncer de mama humano IBH-6 e IBH-4 presentan alteraciones en la expresión de Ecad y localización aberrante de la proteína, así como tienen aumentada la expresión del factor Twist. Estas características pueden relacionarse al comportamiento invasivo de las células.