IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Participación del zinc en la asociación de la proteína CRISP1 al espermatozoide durante la maduración
Autor/es:
MALDERA JA; VASEN G; ERNESTO JI; COHEN DJ; CUASNICU PS
Lugar:
San Pablo, Brasil.
Reunión:
Congreso; XXI Reunión Bienal Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproduccion Humana (ALIRH); 2009
Institución organizadora:
Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproduccion Humana (ALIRH)
Resumen:
La proteína CRISP1 (Proteína Secretoria Rica en Cisteínas), se sintetiza en el epidídimo y se une a los espermatozoides mientras los mismos maduran durante su tránsito por este órgano. Resultados de nuestro grupo indican la existencia de dos poblaciones de CRISP1 sobre la gameta madura: una débilmente unida, removible por fuerza iónica, que se pierde durante la capacitación, y otra que permanece fuertemente unida luego de la capacitación y participa en fertilización. Sin embargo, aún se desconocen los mecanismos involucrados en la interacción entre CRISP1 y el espermatozoide. Teniendo en cuenta la alta concentración de Zn2+ en el fluido epididimario, y su capacidad de unirse a proteínas ricas en cisteínas, investigamos la participación de este catión en la asociación de CRISP1 al espermatozoide durante la maduración. Para ello, espermatozoides inmaduros obtenidos de la cabeza del epidídimo de rata, fueron incubados in vitro durante 3 hs con fluido del cauda epididimario en presencia de Zn2+ (0-2 mM), analizándose la asociación de CRISP1 a las células mediante ensayos de Western blot. Los resultados mostraron que CRISP1 fue detectada en extractos de espermatozoides incubados con Zn2+ pero no así con Mg2+, o con Zn2+ agregado junto al agente quelante EDTA. La asociación de CRISP1 al espermatozoide en presencia de Zn2+ también se evidenció al emplear CRISP1 purificada. Asimismo, la proteína asociada fue posteriormente removida tanto por tratamiento con EDTA como por fuerza iónica. Finalmente, y como otra aproximación al tema, se realizaron estudios en espermatozoides maduros del cauda epididimario, observándose que mientras el tratamiento con EDTA logro remover parte de CRISP1 de las gametas, la presencia de Zn2+ durante la capacitación inhibió la liberación de CRISP1 durante este evento. En conjunto, estos resultados apoyan la participación del Zn2+ en el mecanismo por el cual CRISP1 se asocia al espermatozoide durante la maduración epididimaria.