PAK4 es un factor central en la regulación del citoesqueleto de actina y la exocitosis acrosomal durante la capacitación de espermatozoides murinos

SCHIAVI-EHRENHAUS LJ; UGO B; MARIN BRIGGILER, CI; BUFFONE MG; ROMAROWSKI A; BALESTRINI PA; GILIO N; LUQUE GM; JABLOÑSKI M; KRAPF D

Buenos Aires

Congreso; VIII Congreso de Andrología; 2019

Sociedad Argentina de Andrología

La dinámica de actina juega un rol central en el control de los procesos de exocitosis en célulassomáticas, así como en espermatozoides de numerosas especies. En los espermatozoides demamíferos, la exocitosis acrosomal (EA), un tipo particular de secreción regulada, es un requisitoabsoluto para la fecundación. Este complejo proceso es regulado por numerosos factoresincluyendo el citoesqueleto de actina. Previamente, nuestro grupo demostró la participación delas pequeñas GTPasas de la familia Rho en la vía de señalización que lidera la polimerización deactina asociada a la capacitación. También demostró la participación de LIMK y COFILIN,ambos efectores río abajo de las pequeñas GTPasas modulados por fosforilación. En el presentetrabajo se observó que los efectores de las vías de las GTPasas: slingshot homolog 1 (SSH1),varios miembros de las quinasas activadas por p21 (PAKs), y la proteína de andamiaje 14-3-3z,se expresan en espermatozoides de ratón. Se observó que la cinética de fosforilación de SSH1,conocida fosfatasa de COFILIN en células somáticas, coincide con la de defosforilación deCOFILIN a lo largo de la capacitación. Por otro lado, se determinó que PAK4 y la GTPasaRhoA/C están involucradas en la fosforilación tanto de LIMK1 como de SSH1. Asimismo, tantola inhibición de PAK4 como de RhoA/C provocó una disminución en los niveles de actinapolimerizada. Resultados obtenidos por citometría de flujo revelaron que esta disminución en lapolimerización de actina se vio reflejada en una disminución significativa en el porcentaje deespermatozoides que realizaron la EA. En conjunto, observamos que la quinasa PAK4 y lafosfatasa SSH1 participan en la regulación del equilibrio de fosforilación/desfosforilación deLIMK1/COFILIN, el cual resulta esencial para los cambios dinámicos del citoesqueleto de actinaque ocurren durante la capacitación y la EA.