El sistema Angiopoyetinas 1 y 2 (ANGPT-1 y -2)/Tek es fundamental para el correcto desarrollo y la regulación de la atresia folicular en ovario de ratas prepúberes estimuladas con gonadotrofinas.

ABRAMOVICH D; IRUSTA, GRISELDA; SCOTTI L; HERNANDEZ F; PARBORELL F; TESONE M

Mar del Plata

Congreso; Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas (SAIC); 2009

El sistema ANGPT/Tek tiene un papel fundamental en la maduración de los vasos sanguíneos recién formados. ANGPT-1 recluta células perivasculares, pericitos, que estabilizan los vasos. En estudios previos de nuestro laboratorio, demostramos que la inhibición de ANGPT-1 causa un aumento en el número de folículos atrésicos y una disminución en el número de folículos antrales y preovulatorios en ovarios de ratas tratadas con gonadotrofinas. Objetivos: Evaluar el efecto del sistema ANGPTs/TEK sobre la esteroidogénesis, la apoptosis, la proliferación celular y la estabilidad vascular en ovario de rata. Determinar un posible efecto directo de estos factores sobre las células ováricas de rata. Ratas prepúberes tratadas con eCG fueron inyectadas con un anticuerpo anti ANGPT-1 (Ac ANGPT-1) en un ovario y el  contralateral fue inyectado con suero normal de cabra (control). Los ovarios fueron extraídos a las 48 hs y procesados para inmunohistoquímica de a-actina (marcador de pericitos), de PCNA (marcador de proliferación) y de caspasa-3. Se realizaron western blots de proteínas extraídas de folículos antrales (300-450 mm) aislados por microdisección. Otro set de ovarios fue utilizado para extraer esteroides. Para los experimentos in vitro, se administró a ratas prepúberes dietilestilbestrol (DES) durante 3 días, luego las ratas fueron sacrificadas y se aislaron folículos antrales. Los folículos fueron cultivados por 12 hs en medio libre de suero (basal) o en presencia de ANGPT-1, ANGPT-2 o ambas ANGPTs. Se midieron esteroides en medio condicionado y se aisló ADN de los folículos para medir apoptosis por fragmentación de ADN en geles de agarosa teñidos con bromuro de etidio. La inhibición de ANGPT-1 disminuyó los niveles de PCNA en células de granulosa y tecales; aumentó los niveles del fragmento activo de caspasa-3, p17, y disminuyó el área de pericitos. Además, produjo un aumento de androsterona y una disminución de estradiol en el ovario. En los folículos cultivados in vitro, se observó que ANGPT-1 disminuyó la fragmentación apoptótica de ADN. Este efecto fue revertido mediante la co-incubación con ambas ANGPTs. También se observó un aumento en los niveles de progesterona y de androsterona con ANGPT-2, siendo este último efecto revertido en presencia de ANGPT-1. Conclusión: La alteración en el sistema ANGPTs/TEK produce una desregulación en la proliferación y/o apoptosis de células foliculares, con la consiguiente alteración en el desarrollo y la atresia folicular.