Papel de los receptores a histamina H3 y H4 en las respuestas biológicas mediadas por histamina en las células de carcinoma mamario humano MCF-7

BRENZONI P; MARTINEL LAMAS D; MASSARI N; MONDILLO C; PIGNATARO OP; BERGOC R; RIVERA E; MEDINA V

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

La histamina es una amina biogénica que participa en la regulación de la proliferación y diferenciación celular durante el desarrollo de la glándula mamaria. En el presente trabajo se investigó el papel de los receptores a histamina H3 (RH3) y H4 (RH4) en la regulación de las respuestas biológicas mediada por histamina en la línea celular de cáncer mamario, MCF-7. La ex presión de los receptores se investigó por RT-PCR, inmunofluorescencia y ensayos de unión. La proliferación se evaluó mediante el ensayo clonogénico, recuento celular e incorporación de BrdU. La apoptosis se determinó mediante el ensayo de TUNEL, Anexina-V y el potencial de membrana mitocondrial con el colorante DiOC6. La senescencia se estudió a través de la actividad de â-galactosidasa asociada a senescencia. Los resultados muestran que las células MCF-7 expresan los RH3 (Kd=3,3±0,6 nM) y RH4. La histamina reduce la proliferación de las células MCF-7 en forma dosis dependiente a partir de una concentración 1 nM, aumentando el tiempo de duplicación de 31,3 h a 41,5 h. Mediante el uso de agonistas y antagonistas específicos, determinamos que la histamina disminuye la proliferación a través de los RH3 y RH4 (50% y 60% de inhibición, respectivamente). Este efecto inhibitorio sobre la proliferación se asocia con la inducción de apoptosis observándose un aumento significativo del porcentaje de células Anexina-V positivas (14.6±3.4 vs. 5.0±0.9, P<0.01), TUNEL-positivas (10.5±1.5 vs. 3.6±0.5, P<0.01) y una disminución del potencial de membrana mitocondrial luego de 72 h de tratamiento. Además, el tratamiento con histamina incrementa el porcentaje de células senescentes (14.4±0.4 vs. 7.8±0.5, P<0.01). Los resultados demuestran que los RH3 y RH4 son los principales receptores involucrados en la regulación de la proliferación, apoptosis y senescencia celular mediada por histamina en las células MCF-7 siendo éstos, procesos claves en la carcinogénesis mamaria.