REGULACIÓN CRUZADA ENTRE RECEPTORES H1 Y H2 A HISTAMINA POR LIGANDOS AGONISTAS Y AGONISTAS INVERSOS

DIAZ NEBREDA, A; ECHEVERRIA E; ZAPPIA C; DAVIO C; FERNANDEZ N; MONCZOR F; SHAYO, C

Congreso; LX Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica. Reunión Científica Anual 2015 Sociedad Argentina de Fisiología. 18 al 21 de noviembre de 2015- Mar del Plata; 2015

Los receptores H1 y H2 a histamina (RH1 y RH2) son receptores acoplados a proteína G, que regulan la producción de IPs y de AMPc respectivamente. Se coexpresan en varios tejidos y regulan procesos fisiológicos y patológicos como alergia/inflamación, secreción gástrica, neuromodulación, proliferación y diferenciación celular. Previamente hemos descrito en células leucémicas U937 y en células CHO que sobreexpresan RH1 y RH2 que el tratamiento con sus agonistas (AGO) conduce a la desensibilización (DSS) cruzada de ambos receptores. El objetivo de este trabajo es profundizar el estudio de la DSS cruzada causada por AGO o AGO inversos de estos receptores. En células HEK293T transfectadas con RH1 y RH2 observamos que el estímulo con AGO H1 induce la DSS del RH2. Dado que la DSS homóloga de ambos receptores involucra la participación de GRK2, evaluamos que dominio de GRK2 participa en la DSS cruzada utilizando las mutantes GRK2K220R y GRK2D110A (sin actividad kinasa y RGS, respectivamente). El dominio kinasa resultó necesario para la DSS heteróloga. Por otro lado, evaluamos la capacidad de AGO H2 de interferir sobre la respuesta inflamatoria/antiinflamatoria de agonistas/agonistas inversos del RH1, respectivamente. Para ello, cotransfectamos células HEK293T con RH1, RH2 y un plásmido que codifica para luciferasa río abajo del promotor de IL6. En este sistema, se observó que el AGO H2 revirtió los efectos sobre la actividad del reportero inducidos por AGO y AGO inversos H1. Por último, determinamos en células U937 que ligandos AGO inversos del RH1 pueden, al igual que los AGO, causar una DSS cruzada de la respuesta del RH2.Estos resultados describen mecanismos involucrados en la regulación cruzada entre los RH1 y RH2 y muestran evidencias de la implicancia que dichos mecanismos poseen sobre la regulación de procesos fisiológicos/patológicos modulados por ligandos antihistamínicos, ampliamente utilizados en la clínica para combatir situaciones de tipo alérgico-inflamatorias.