El estrés oxidativo induce la expresión de ARN no codificante de origen telomérico

NATALIA M. GALIGNIANA; ANA MARÍA CABANILLAS; GRACIELA PIWIEN PILIPUK

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2015

SAIC

Los telómeros fueron considerados por mucho tiempo como regiones del genoma transcripcionalmente silentes debido a la presencia de múltiples marcadores epigenéticos de heterocromatina. No obstante, en la última década se han identificado ARNs no codificantes transcriptos a partir de los telómeros, conocidos como TERRA (telomeric repeat-containing RNA), que se propone controlan la estabilidad estructural de los telómeros y su elongación. Se ha reportado que la inflamación crónica in vivo induce disfunción telomérica por sobreproducción de especies reactivas del oxígeno vía COX-2, lo cual es revertido por tratamiento anti-inflamatorio ó antioxidante. Consecuentemente, hipotetizamos que los TERRA son modulados por estrés oxidativo. Para abordar el estudio, realizamos curvas de tiempo incubando a las células renales embrionarias humanas HEK-293T en presencia de los agentes oxidantes peróxido de hidrógeno , arsenito de sodio ó butionina sulfoximina, y evaluamos la expresión de TERRAs mediante PCR empleando primers específicos y revelando los productos de amplificación en gel de agarosa. Observamos que los TERRA se modulan en forma oscilante dentro de las 2 h de iniciado es estrés oxidativo y que dicho perfil de inducción varía según el agente oxidante utilizado, sin embargo se observó en los tres casos una clara inducción de los niveles de TERRA a las 4 h de tratamiento. El uso del antioxidante N-acetil-L-cisteína previene el aumento de TERRA. También encontramos que la inducción de los TERRA se revierte entre 1-2 h luego de haber cesado el tratamiento con peróxido de hidrógeno, y al cabo de 24 h ya se encuentran por debajo de los niveles basales. Estos resultados sugieren una expresión dinámica de los TERRA, los que posiblemente ejercerían un rol protector, ya que al desaparecer el agente estresor disminuye rápidamente su expresión.