Cadherina epitelial y el proceso de fecundación. Estudios en el modelo bovino

VAZQUEZ-LEVIN MH

Buenos Aires, Argentina

Congreso; Primeras Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación en Reproducción Animal; 2008

Facultad de Ciencias Veterinarias de la UBA

La Cadherina epitelial (cadE) es una glicoproteína de transmembrana que interviene en la adhesión celular de manera dependiente del ión calcio, uniéndose por sus dominios extracelulares preferentemente a otras moléculas de cadE en células adyacentes. En mamíferos, el transporte espermático en el tracto de la hembra y la interacción de las gametas involucra eventos de adhesión no dilucidados a nivel molecular. Nos propusimos caracterizar la expresión de cadE en tejidos del tracto reproductor y en las gametas, y evaluar su participación en la interacción del espermatozoide con las células epiteliales oviductales (CEO) y con estructuras del complejo ovocito cumulus oophorus (COC). Utilizamos el modelo bovino para llevar a cabo un conjunto de estudios, cuyos resultados se resumen a continuación: CadE fue inmunolocalizada 1) en células epiteliales de secciones de tejido oviductal y en las CEO en cultivo, 2) en las células del cumulus y en sus proyecciones en la zona pellucida (ZP), y en el oolema ovocitario, 3) en el capuchón acrosomal y reborde apical de espermatozoides (del eyaculado o previamente  congelados) no capacitados con acrosomas intactos, 4) en el reborde apical de espermatozoides con acrosomas intactos y capacitados in vitro en un medio definido, y 5) en estructuras que corresponderían a la membrana acrosomal interna y al segmento ecuatorial de espermatozoides reaccionados con lisofosfatidilcolina. En los estudios de interacción con las CEO se determinó que los espermatozoides unidos a las células y los liberados del co-cultivo por agregado de heparina presentaban la misma localización de cadE que la encontrada en espermatozoides no capacitados y capacitados in vitro en medio definido. La preincubación de los espermatozoides con anticuerpos anti cadE condujo a una disminución significativa (p<0,001) del número de espermatozoides unidos a las CEO in vitro. En los ensayos de interacción de gametas se determinó que la preincubación de espermatozoides con anticuerpos anti cadE inhibió significativamente (p<0,05) su capacidad de fecundar los ovocitos in vitro, utilizando tanto ovocitos denudados como COCs; asimismo, el anticuerpo anti cadE produjo una inhibición significativa (p<0,05) de la interacción espermática con la ZP y con el oolema, en ensayos específicos. Los estudios presentados describen, por primera vez en el modelo bovino, la presencia de cadE en espermatozoides, estructuras del COC y en células oviductales, y sugieren la participación de esta proteína en la adhesión celular durante la formación/disociación del reservorio oviductal y la fecundación.