ENFOQUE BIOINFORMÁTICO PARA PREDECIR EL POSIBLE EFECTO DELETÉREO DE VARIANTES DE SECUENCIA EN PACIENTES CON DEFICIENCIA EN 21 HIDROXILASA

BRUQUE, C.D.; FERNANDEZ, C.S.; DELEA, M.; ORZA, J.V.; NADRA, A.D.; DAIN, L.

Mar del Plata- Buenos Aires

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

Entre el 90-95% de las Hiperplasias Suprarrenales Congénitas sedeben al déficit de la enzima 21-hidroxilasa (21-OH). La 21-OH es uncitocromo P450 y posee 2 sustratos: la 17-hidroxiprogesterona (17- OHP) y la progesterona (P). Recientemente, se reportó el cristal de la21-OH humana (OID:4Y8W) asociado a P. En trabajos previos denuestro laboratorio, se realizó el modelado molecular de la 21-OHhumana a partir del cristal de la bovina asociado a 17-OHP(OID:3QZ1). El objetivo de este trabajo fue la generación de un modelopredictivo del posible efecto deletéreo de variantes de secuencia en elgen que codifica a la 21-OH a partir del modelo molecular de la 21-OHhumana previamente realizado y del cristal de la 21-OH humana. Conel modelo obtenido a partir de la proteína bovina y del cristal de laproteína humana, se generaron 84 mutantes reportadas en labibliografía para las cuales se conoce su actividad residual (AR) invitro. Inicialmente se establecieron aquellas variantes deletéreas quese encontraban en sitios de unión al hemo, ligandos o cofactores. Paralas mutantes restantes, se determinó la variación de la energía libreasociada a cada variante respecto de la secuencia salvaje medianteel programa Foldx 3.0. Los valores obtenidos se correlacionaron conlas AR de los ensayos in vitro mediante una regresión lineal por elmétodo de cuadrados mínimos y se realizó un test de permutacionespara determinar la significancia estadística de la pendiente de ambasrectas. Los resultados obtenidos demostraron un R²=0.80 y 0.69 parael modelo a partir del OID:3QZ1 y OID:4Y8W, respectivamente, conuna significancia estadística de la pendiente para ambas rectas (p