ESPECIES REACTIVAS DEL OXÍGENO (ROS) COMO INTERMEDIARIAS EN EL MECANISMO DE ACCIÓN DE PROSTAGLANDINA D2 (PGD2) EN CÉLULAS DE SERTOLI MURINAS TM4.

ROSSI SP ; WINDSCHUETTI S ; REY ARES V; CALANDRA RS ; MAYERHOFER A ; FRUNGIERI MB

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Las células de Sertoli (CS) brindan soporte estructural y metabólico alas células germinales durante la espermatogénesis siendo el lactatoel principal sustrato energético producido. Previamente, hemosdescripto un efecto estimulatorio sobre la producción de ROS ejercidopor PGD2 en CS murinas TM4 y la consecuente activación del sistemaanti-oxidante en respuesta al estrés oxidativo generado. En estetrabajo hemos detectado que PGD2 estimula la producción de H2O2en CS. Es sabido que las ROS no solo generan peroxidación lipídicay daño tisular, sino también participarían como segundos mensajerosintracelulares regulando la expresión de ciertos genes. El objetivo deeste trabajo fue investigar si las ROS producidas en respuesta a PGD2en CS murinas TM4, actúan como segundos mensajeros modulandola transducción de señales y la expresión génica. PGD2 (1μM)aumentó el grado de fosforilación (Western blot, 15 min de incubación)de p-Akt y p-CREB, efecto que fue revertido en presencia del agenteanti-oxidante N-acetil-L-cisteína (NAC; 5mM) en CS TM4 [unidadesarbitrarias (UA), p-Akt/Akt = control: 1±0,09a; PGD2: 1,57±0,10b; PGD2+ NAC: 0,73±0,06c; NAC: 0,64±0,05c; p-CREB/actina = control:1±0,09a; PGD2: 1,59±0,12b; PGD2 + NAC: 0,62±0,05c; NAC:0,79±0,09a,c; X±SEM; diferentes letras: P<0,05]. PGD2 tambiénestimuló la expresión [PCR en tiempo real (qPCR), 30 min deincubación] de lactato deshidrogenasa A (LDH-A) en CS TM4. Esteefecto fue revertido en presencia de NAC (UA, control: 1±0,09a; PGD2:3,04±0,20b; PGD2 + NAC: 1,85±0,18c; NAC: 1,11±0,10a; X±SEM;diferentes letras: P<0,05). La incubación de CS TM4 en presencia deLY 294002 (LY; 10μM), inhibidor de la quinasa PI3 asociada a lafosforilación de Akt, revirtió la inducción por PGD2 de la expresión deLDH-A (P<0,05). En resumen, estos resultados sugieren que las ROSgeneradas por PGD2 en CS murinas TM4 actuarían como segundosmensajeros regulando la expresión de LDH-A a través de la vía deAkt/CREB.