IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización del fenotipo reproductivo de ratones doble knockout para CRISP2 y CRISP4
Autor/es:
BRUKMAN NICOLÁS; CARVAJAL GUILLERMO; TORRES PABLO; CARAMELO JULIO; LOMBARDO DANIEL; DA ROS VANINA; CUASNICÚ PATRICIA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LX Reunión científica anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
Los cuatros miembros de la familia CRISP (Cysteine-Rich Secretory Proteins) (CRISP1-4) se expresan mayoritariamente en el tracto reproductor masculino de mamíferos, se encuentran presentes en el espermatozoide y participan en el proceso de fertilización. A pesar de la relevancia funcional de las CRISP, los animales knockout (KO) para CRISP1, CRISP2 y CRISP4 resultaron fértiles, indicando la existencia de mecanismos compensatorios entre dichas proteínas. En base a ello, nos planteamos como objetivo estudiar el fenotipo reproductivo de animales deficientes en más de una proteína CRISP simultáneamente. En este trabajo, se generó una colonia doble KO (KO/KO) para los genes crisp2 y crisp4 por medio de cruzas entre las colonias KO individuales. La fertilidad de los machos KO/KO fue evaluada por apareo natural y no fue significativamente diferente a la de los machos control (WT/WT). Sin embargo, en los ensayos de fertilización in vitro, los espermatozoides KO/KO lograron fertilizar un número significativamente menor de ovocitos que los WT/WT. Posteriormente, se estudiaron in vitro diferentes parámetros espermáticos asociados al proceso de capacitación, evidenciándose alteraciones en la fosforilación de proteínas en residuos tirosina, las cuales no habian sido observadas en las colonias individuales, como así también en los porcentajes de reacción acrosomal inducida por progesterona e hiperactividad. Finalmente, se observó que la ausencia de CRISP2 en los espermatozoides KO para esta proteína produjo una desregulación en el calcio citosólico durante la capacitación, resultado consistente con las alteraciones antes mencionadas dada la calcio-dependencia de los eventos asociados al proceso de capacitación. En conjunto, nuestras observaciones apoyan la existencia de una cooperación entre las proteínas CRISP2 y CRISP4 en la regulación de la función espermática con el fin de asegurar el éxito de la fertilización.