Heparán Sulfato y su papel en el reconocimiento espermatozoide-oviducto en humanos

JUÁREZ YAMILA RAQUEL; GALOTTO CAMILA; GIL SANTIAGO; JULIANELLI VANINA; GOGORZA SEBASTIÁN ; PIÑEIRO DE CALVO LUCRECIA; CALVO JUAN CARLOS; ROMANATO MARINA

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) Reunión anual de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2015

SAIC

Describimos previamente que el heparán sulfato (HS) es fundamental en la descondensación cromatínica espermática durante la fecundación y que se encuentra en el ooplasma y espacio perivitelino de los oocitos. Objetivo: Estudiar la presencia de HS en el espermatozoide lavado, capacitado y reaccionado y su posible rol en la interacción con células oviductales en cultivo. El protocolo y los Consentimientos Informados han sido aprobados por los Comités de Ética del HIBA y del IBYME. Metodología: Los espermatozoides se obtuvieron de individuos normozoospérmicos (OMS) y se procesaron para obtener la fracción mótil por swim-up. Se capacitaron y se indujo la reacción acrosomal con ionóforo de calcio. La presencia de HS se analizó por citometría de flujo, con anticuerpo anti-HS y segundo anticuerpo marcado con FITC. Las muestras de oviducto se obtuvieron de pacientes premenopáusicas, sin infecciones o enfermedades neoplásicas, por laparoscopía o histerectomía y se procesaron dentro de las 2 h. Luego de separar el tejido conectivo, se cortaron longitudinalmente para exponer el interior y, por raspado, obtener las células. Para la interacción, se preincubaron las células confluentes con heparina 46 µM o medio y, luego de lavar, se agregaron los espermatozoides. Se fijaron las células con glutaraldehído, fotografiaron 20 campos y contaron los espermatozoides unidos. Resultados: El HS permanece unido al espermatozoide, incluso luego de la reacción acrosomal (lavados vs capacitados, NS; lavados vs reaccionados, p