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La epigenética puede modificar la expresión génica del espermatozoide. Metilación de bases, de histonas y posiblemente protaminas (Pr), como también la presencia y cantidad relativa de Pr, condicionan la fecundación y el mantenimiento del embrión. Para evaluar la presencia y relación de Pr en la cromatina espermática, presentamos el aislamiento, electroforesis, cuantificación y caracterización por Western blot (WB) de las mismas. El protocolo y Consentimiento Informado para los donantes de semen fue aprobado por el Comité de Ética del IBYME. El semen de donantes normozoospérmicos (OMS) se lavó en buffer Tris/NaCl y resuspendió en buffer con SDS. Luego de sonicar se separaron los núcleos en colchón de sacarosa. El precipitado nuclear se lavó con PMSF y las proteínas se aislaron con guanidina y DTT, se trataron con etanol frío, HCl y TCA y se guardaron a -20oC hasta su uso. Luego de electroforesis ácida se analizó por WB la presencia de Pr1 y Pr2. Otro gel se analizó digitalmente para obtener la relación cuantitativa entre Pr. Se descondensaron in vitro espermatozoides con heparina (H) y/o dermatán sulfato (DS) y GSH. El resultado de esta combinación de técnicas permitió demostrar la presencia de Pr1 y Pr2, de los posibles productos de procesamiento y/o modificación postraduccional de esta última y generar una curva de calibración que permitiría cuantificar la presencia relativa de cada una en muestras de pacientes. El análisis in silico de las Pr y de H y DS indicó una distribución diferencial de cargas que se reflejaría en una descondensación diferencial en presencia de uno u otro glicosaminoglicano. Los resultados de incubar los espermatozoides con H y/o DS indicaron que ambos GAGs descondensan la cromatina con diferente potencia (DS vs H p