Evidencias sobre la participación de cadherina epitelial en el proceso de fecundación en los modelos humano, murino y bovino

VAZQUEZ-LEVIN MH Y COL (VER DETALLE EN EL RESUMEN)

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XX Reunión Bienal de ALIRH; 2007

ALIRH (Asociacion latinoamericana de Investigacion en Reproduccion Humana

EVIDENCIAS SOBRE LA PARTICIPACIÓN DE CADHERINA EPITELIAL EN EL PROCESO DE FECUNDACIÓN EN LOS MODELOS HUMANO, MURINO y BOVINO.   Vazquez-Levin MH1, Veiga MF1, Marín-Briggiler CI1, Caballero J1, González-Echeverría MF2, Cetica P3, Dalvit G3, Cameo M4, Choren V4. 1Instituto de Biología y Medicina Experimental (IBYME)-CONICET-UBA, Buenos Aires, Argentina. 2 Fertilab, Buenos Aires, Argentina. 3Química Biológica, Facultad de Ciencias Veterinarias (UBA), Buenos Aires,  Argentina. 4 Biología de la Reproducción, Buenos Aires, Argentina.   JUSTIFICACIÓN: Las cadherinas son glicoproteínas de membrana que intervienen en procesos de adhesión celular dependientes de la presencia de iones calcio. Estudios previos de nuestro grupo han demostrado la presencia y localización de cadherina epitelial (cadE) en estructuras del ovocito y en espermatozoides humanos, murinos y bovinos (1-3), en regiones involucradas en el reconocimiento e interacción entre las gametas durante la fecundación. OBJETIVO: Determinar la participación de cadE en la fecundación en los modelos humano, murino y bovino. METODOLOGÍA: Se llevaron a cabo ensayos de unión de espermatozoides a la zona pellucida (ZP) homóloga (ensayo de hemizona) y de penetración de ovocitos de hámster sin ZP en el modelo humano. En los modelos murino y bovino se realizaron ensayos de fecundación in vitro. Los estudios se hicieron en presencia o ausencia de anticuerpos anti cadE dirigidos contra diferentes dominios extracelulares de la proteína: SC#7870 (Santa Cruz Biotech), HECD-1 y SHE78-7 (Zymed Laboratories) y DECMA-1 (Sigma).   RESULTADOS Y CONCLUSIONES: 1) La preincubación de espermatozoides humanos con anti cadE condujo a una disminución significativa del número de células unidas a la ZP (100 mg/ml SC#7870=18±5 vs control=31±9 espermatozoides unidos/hemizona; p<0,05; media±EEM; n=7). Resultados similares fueron obtenidos con otros anticuerpos utilizados (HECD-1 y SHE78-7). 2) La preincubación de ovocitos de hámster con anti cadE resultó en una disminución significativa en el % de ovocitos con al menos un espermatozoide penetrado (20 mg/ml SC#7870=57±4 % vs control=91±5 %, p<0,05; n=6). 3) En los modelos murino y bovino, la preincubación de los espermatozoides con anti cadE inhibió de manera significativa la tasa de fecundación in vitro (murino: 20 mg/ml SC#7870=25±8 % vs control=52±8 % ovocitos fecundados, p<0,05; n=8; bovino: 35 mg/ml DECMA-1=57±7 % vs control=89±4 %, p<0,05; n=5). En conjunto, los resultados obtenidos sugieren la participación de cadE en el proceso de fecundación en mamíferos.   Vazquez-Levin et al. J. Androl. (2003) Supl. Marzo-Abril, pg. 56. (2) Veiga et al. J Androl (2005), Supl. Marzo-Abril, pg. 83. (3) Caballero et al. J. Androl. (2006), Supl. Marzo-Abril, pg. 72.