EVALUACION DE LA PRESENCIA Y LOCALIZACION DE DISADHERINA EN ESPERMATOZOIDES HUMANOS EN DIFERENTES ESTADIOS FUNCIONALES DE LA GAMETA.

GABRIELLI N.; MATOS ML.; GONGORA A.; BALDI A.; HIROHASHI S.; NAKANISHI Y.; VAZQUEZ-LEVIN, MH.

Capital Federal, Argentina

Congreso; "V Congreso de la Sociadad Argentina de Andrología"; 2007

Sociedad Argentina de Andrología

EVALUACION DE LA PRESENCIA Y LOCALIZACION DE DISADHERINA EN ESPERMATOZOIDES HUMANOS EN DIFERENTES ESTADIOS FUNCIONALES DE LA GAMETA. Gabrielli N., Matos ML., Gongora A., Baldi A., Hirohashi S., Nakanishi Y., Vazquez-Levin, MH. Instituto de Biología y Medicina Experimental.Vuelta de Obligado 2490. Buenos Aires Argentina Introducción: Disadherina (dys) es una glicoproteína de transmembrana (50-55 KDa) identificada inicialmente en tejidos tumorales y presente en algunos tipos celulares normales; dys modularía Cadherina epitelial (cadE) y la Na,K-ATPasa (Nam et al, 2007). La presencia de estas últimas proteínas en el espermatozoide humano ha sido descripta (Vazquez-Levin et al, 2003; Sanchez et al, 2006, respectivamente). Objetivo: determinar la presencia de dys en tejidos reproductivos masculinos y gametas y su localización en espermatozoides no capacitados, capacitados y reaccionados. Métodos: La expresión del ARNm de dys en testículo, epidídimo y espermatozoides fue evaluada por retrotranscripción del ARN-PCR (RT-PCR) y Western immunoblotting; su localización en las gametas fue estudiada con ensayos de co-localización utilizando el anticuerpo anti-dys y la lectina (aglutinina) de pisum sativum. Como controles se usaron células MDA-MB-231 y HUVEC. Resultados: La amplificación específica del fragmento de dys a partir de ARN de espermatozoides, testículo y de caput, corpus y cauda epididimarios reveló su expresión en órganos del tracto reproductor y espermatozoides. En ensayos de inmunocitoquímica se observó una señal específica para dys en la pieza principal del flagelo de espermatozoides no capacitados, capacitados y reaccionados en más de un 90% de las células (n=5 donantes). En espermatozoides permeabilizados, la presencia de inmunorreactividad específica para dys en el acrosoma fue confirmada en el 85 ± 6 % de las células, señal que desaparece en espermatozoides que han sufrido la exocitosis acrosomal. En extractos proteicos de espermatozoides se reveló una forma específica de mayor peso molecular (91 KDa) al esperado, que podría resultar de una glicosilación diferencial. Conclusiones: Este es el primer informe que describe la expresión de disadherina en espermatozoides humanos. Disadherina se localiza en regiones subcelulares involucradas en la motilidad (flagelo) e interacción espermatozoide-ovocito (acrosoma) durante la fecundación, y en las que se ha descripto la presencia de la Na,K-ATPasa y Cad-E. Nota: el resumen será enviado a SAA 2007