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La familia CRISP comprende un grupo de proteínas secretorias de 20-30 kDa, ricas en cisteínas y muy conservadas evolutivamente. El primer miembro fue identificado por nuestro laboratorio en epidídimo de rata y se conoce como CRISP1. Posteriormente, se describieron CRISP2 (testicular), CRISP3 (ampliamente distribuida) y CRISP4 (epididimaria). Dado que se han detectado CRISP1, 2 y 4 en el espermatozoide de rata, el objetivo del presente estudio fue investigar la posible existencia de CRISP3 en la gameta masculina. El anticuerpo contra CRISP3 humana (anti-CRISP3), utilizado en Western blots (Wb), fue capaz de reconocer a la proteína CRISP3 nativa equina (25kDa) como así también de detectar una banda de 23kDa en extractos de espermatozoides y epidídimo de rata. El tratamiento de dichos extractos con b-mercaptoetanol produjo un corrimiento en la movilidad de la banda confirmando la presencia de puentes disulfuro en la molécula. Con el fin de analizar el tipo de asociación de la proteína al espermatozoide, las células fueron sometidas a diferentes tratamientos de extracción, evaluándose la presencia de la proteína por Wb. Los resultados indicaron que la misma no fue removida por PBS, 2M NaCl, pH 3, pH 11 ni 250 mM DTT, y fue totalmente extraída por 1% Tritón X-100. El análisis del comportamiento de la proteína durante la capacitación (por Wb y densitometría), reveló que los extractos de espermatozoides capacitados in vitro por 5 hs presentaban una banda del mismo peso molecular y con una intensidad menor pero no significativamente diferente que en los controles, indicando que la mayor parte permanecería en la gameta luego de la capacitación y no sufriría procesamiento proteolítico. En conjunto, estos resultados apoyan la existencia de la proteína CRISP3 en el espermatozoide de rata y sugieren su posible participación en el proceso de fertilización.