“Participación de la proteína testicular CRISP2 durante el proceso de fusión espermatozoide-ovocito”

BUSSO D, COHEN DJ, GOLDWEIC NM, HAYASHI M, KASAHARA M, VALCARCEL A Y CUASNICÚ, PS

Chillán, Chile.

Congreso; XVIII Reunión Anual de la Sociedad Chilena de Reproducción y Desarrollo; 2007

La proteína CRISP2 se expresa en células haploides testiculares y está presente en espermatozoides. Su alta homología con CRISP1, una proteína epididimaria involucrada en la fusión de gametas, sugería que CRISP2 podía cumplir una función durante la fecundación. En este trabajo estudiamos la localización subcelular de CRISP2 en espermatozoides de ratón y humano y su participación en las diferentes etapas de la fecundación. Ensayos de inmunofluorescencia indirecta (IFI) y de extracción diferencial de proteínas indicaron que CRISP2 es un componente intra-acrosomal que permanece asociado a los espermatozoides luego de la capacitación y la reacción acrosomal. Ensayos de fecundación in vitro de ovocitos de ratón con zona pelúcida indicaron que anti-CRISP2 provocó una inhibición del proceso de fusión y una acumulación de espermatozoides perivitelinos. Asimismo, anti-CRISP2 provocó una inhibición de la fusión de ovocitos de hamster por espermatozoides humanos. Respaldando estos resultados, la proteína recombinante CRISP2 se asoció a la superficie de ovocitos de ratón y humano, en un área similar a la obtenida para CRISP1. Ensayos de competencia entre CRISP1 y CRISP2 mediante IFI determinaron que ambas proteínas compartían el mismo sito de unión en el ovocito, lo cual sugiere una posible cooperación funcional de moléculas para asegurar el éxito de la fecundación.