Desarrollo de inmunorreactividad para cadherina epitelial espermática durante la maduración epididimaria. Estudios en los modelos bovino y murino

VEIGA, VAZQUEZ-LEVIN Y COL (VER DETALLES EN RESUMEN)

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XX Reunión Bienal de ALIRH, Buenos Aires, Abril 2007.; 2007

ALIRH (Asociacion latinoamericana de Investigacion en Reproduccion Humana

Desarrollo de inmunoRreactividad PARA cadherina epitelial ESPERMATICA durante la maduración epididimaria. Estudios en los modelos bovino y murino.   Veiga MF1*, Caballero J1*, Fornés M2, Sullivan R3, Vazquez-Levin MH1   1Instituto de Biología y Medicina Experimental (IBYME)-CONICET-UBA, Buenos Aires, Argentina. 3Instituto de Histología y Embriolología (IHEM), CONICET, Mendoza, Mendoza, Argentina. 4Universidad Laval, Montreal, Canadá.   *Igual contribución de ambos autores en el estudio realizado.   JUSTIFICACION: Los espermatozoides adquieren la capacidad fecundante durante la maduración epididimaria. Las proteínas sintetizadas por el epidídimo, al menos en parte, serían transferidas a través de estructuras membranosas denominadas epididimosomas, a través de mecanismos moleculares aún no caracterizados. Cadherina epitelial (Cad-E) es una molécula de adhesión celular presente en espermatozoides del cauda epididimario de ratón y en espermatozoides eyaculados de toro, en regiones propuestas para la participación en el proceso de fecundación (1,2). OBJETIVOS: 1) Evaluar la expresión de Cad-E en epidídimo bovino y murino. 2) Caracterizar la localización de Cad-E en espermatozoides del caput, corpus and cauda epididimario, y comparar con la de espermatozoides testiculares. 3) Evaluar la presencia de Cad-E en epididimosomas del fluido epididimario. METODOLOGIA: La expresión de cad-E en tejidos fue evaluada por inmunohistoquímica, y la localización de cad-E en espermatozoides testiculares y epididimarios fue realizada por inmunocitoquímica. La presencia de cad-E en epididimosomas fue evaluada por medio de inmuno microscopía electrónica de transmisión (IMET) y Western immunoblotting (WIB). En todos los casos se utilizaron anticuerpos específicos dirigidos contra diferentes regiones de la proteína SC#7870 (Santa Cruz Biotech), DECMA-1 (Sigma), (C20820, Beckton Dickinson). RESULTADOS Y CONCLUSIONES: Utilizando ensayos de inmunohistoquímica se confirmó la expresión de Cad-E en las células epiteliales principales epididimarias del caput, corpus y cauda. Estudios de inmunocitoquímica revelaron una señal específica para Cad-E en el reborde apical (toro), acrosoma (ratón) y la región post-acrosomal (toro, ratón) de espermatozoides de los tres segmentos, mientras que se detectaron niveles bajos de Cad-E en las células recuperadas del testículo, mostrando una localización homogénea a lo largo de la célula (ratón) o sólo en la región post-acrosomal (toro) y su presencia en epididimosomas se reveló por IEM (ratón) y por WIB (toro), mostrando formas de peso molecular de 120, 110, y 35 KDa. En conclusión, se encontraron diferencias en la inmunodetección de Cad-E entre espermatozoides testiculares y epididimarios. Su expresión en el epitelio epididimario y en espermatozoides recuperados del tejido y la presencia en epidididmosomas sugiere un rol para estas vesículas en su transferencia durante la maduración epididimaria.   (1) Veiga et al. J. Androl. (2005), Supl. Marzo-Abril, pg. 83. (2) Caballero et al. J. Androl. (2006), Supl. Marzo-Abril, pg. 72.