Mecanismo de respuesta cruzada entre los receptores H1 y H2 de histamina

C NOTCOVICH, C DAVIO, C SHAYO.

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Los receptores a histamina pertenecen a la familia de receptores acoplados a proteína G (GPCRs). El rH1 transduce su señal vía Gq incrementando la producción de inositoles fosfato (IPx), el rH2 conduce a un aumento en los niveles de AMPc. Numerosos trabajos han sugerido la existencia de mecanismos de regulación cruzada (crosstalk) entre ambos receptores, de forma tal que la activación de uno de ellos modula la respuesta del otro. Si bien el crosstalk ha sido ampliamente estudiado para diversos GPCRs, aún no se conocen los mecanismos para el rH1 y el rH2. Por lo tanto, nuestro objetivo es evaluar la regulación recíproca entre el rH1 y rH2 en células CHO transfectadas con ambos receptores (CHOH1-H2). Se evaluó la capacidad de respuesta de los rH1 o rH2 en células CHOH1-H2 pretratadas durante distintos tiempos con agonista H1 100μM (2, 3-trifluormetilfenilhistamina) o agonista H2 10μM (amtamina). Observamos una disminución en la respuesta de AMPc del rH2 dependiente del tiempo de incubación con agonista H1 (35±3%, t=1h). A su vez, el pretratamiento con amtamina redujo la acumulación de IPs en respuesta al agonista H1 (44±4%, t=1h). Este efecto no fue revertido por el inhibidor de PKA, KT5720. Por otro lado, el aumento de AMPc provocado por forskolina no modificó la respuesta del rH1, indicando que el AMPc no es responsable del crosstalk observado entre el rH2 y el rH1. Ha sido descripto que tanto el rH1 como el rH2 son internalizados luego de ser activados. Para analizar si este proceso está involucrado en el crosstalk entre el rH1 y el rH2, las células fueron tratadas durante 1 h con agonista H1 o H2 y los receptores fueron evaluados por ensayos de unión. El pretratamiento con amtamina redujo el número de rH1 en membrana en un 51±4% mientras que el agonista H1 redujo el número de rH2 en un 40±2%. Estos resultados indican que la cointernalización de los receptores H1 y H2 es al menos uno de los mecanismos involucrados en el crosstalk existente entre estos receptores.