IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
ROR1 participa en la adhesión y migración celular en melanoma.
Autor/es:
FERNANDEZ N; PICCO ME; LÓPEZ BERGAMI P.
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2014
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
ROR1 (Receptor tyrosine kinase-like Orphan Receptor 1) es un receptor del ligando Wnt5a y cumple un importante rol durante el desarrollo embrionario y en ciertas patologías en el adulto, particularmente en cáncer. Por ejemplo, se demostró que ROR1 participa en el crecimiento tumoral y en la Transición Epitelio ? Mesenquimal (TEM) en células de cáncer de mama. Para mejorar nuestro entendimiento de los procesos mediados por ROR1 en melanoma utilizamos las estrategias de pérdida y ganancia de función: por un lado generamos células A375 que presentan disminuida la expresión de ROR1 (A375-scramble y A375-shROR1) y células que sobreexpresan el ADNc de ROR1 (A375-vacío y A375-ROR1). La alteración en los niveles de ROR1 fue confirmada por PCR en tiempo real, western blot y citometría de flujo. Luego de haber demostrado en trabajos previos que ROR1 participa tanto en la proliferación como en la supervivencia celular, en este estudio nos enfocamos en su posible rol en la adhesión y migración. El silenciamiento de ROR1 aumentó significativamente la adhesión celular a los 30 minutos (1.44±0.10 vs 1.00±0.12 en el control). Por otro lado, el aumento en la expresión de ROR1 generó una disminución significativa en la adhesión (0.80±0.06 vs 1.00±0.04 en el control). A su vez, ensayos de cicatrización de herida revelaron un aumento en la migración celular en las células A375-ROR1 (20.42±3.48 vs 11.36±2.35 en el control), mientras que la migración disminuyó en las células A375-shROR1 (7.51±1.60 vs 12.43±1.56 en el control). Los cambios en los niveles de ROR1 afectaron directamente la expresión de los marcadores mesenquimales N-cadherina y vimentina medida por PCR en tiempo real y western blot. Los niveles de ambas moléculas de adhesión aumentaron significativamente al sobreexpresar ROR1 y disminuyeron significativamente en las células A375-shROR1. En conjunto, estos resultados demuestran la participación de ROR1 en los procesos de adhesión y migración celular en melanoma.