Efecto de PGD2 sobre el estado oxidativo en células de Sertoli de la línea celular murina TM4

ROSSI SP; MATZKIN ME; WINDSCHUETTL S; REY V; CALANDRA RS; MAYERHOFER A; FRUNGIERI MB

Mar del Plata

Congreso; LVIV Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, SAIC; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica, SAIC

Las células de Sertoli brindan soporte estructural e intervienen en la proliferación y diferenciación de las células germinales a través del suministro de una amplia variedad de factores. Los mismos incluyen hormonas, sustratos energéticos y agentes pro- y anti-apoptóticos. Previamente, hemos descripto la expresión de la enzima ciclooxigenasa 2 (COX2), clave en la biosíntesis de prostaglandinas (PGs), en células inmunes testiculares (macrófagos y mastocitos), de Leydig y de Sertoli. La línea celular murina TM4 expresa el receptor de PGD2 (DP), sugiriendo la participación de esta PG en la regulación de la actividad de las células de Sertoli. El objetivo de este trabajo ha sido investigar si PGD2 modula el estado oxidativo en células de Sertoli TM4. La producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) fue evaluada por fluorimetría a través de la generación del compuesto fluorescente 2´,7´-diclorofluoresceína. PGD2 (1 µM) aumentó significativamente la generación de ROS en células TM4. Este efecto fue revertido en presencia del agente anti-oxidante N-acetil-L-cisteína (NAC; 1mM) (unidades arbitrarias [UA], control: 868±133; PGD2: 4464±464*; PGD2 + NAC: 1606±80; NAC: 1132±57; X±SEM; *P<0,05). Asimismo, PGD2 estimuló significativamente la expresión [determinada por PCR en tiempo real (qPCR), luego de 30 min de incubación] de superóxido dismutasa 1 (SOD1) (valor arbitrario asignado al control: 1±0,09; PGD2: 1,64±0,2*; X±SEM; *P<0.05) y glutatión peroxidasa (GPX) (control: 1±0,2; PGD2: 2,28±0,3*; X±SEM; *P<0,05). PGD2 también estimuló la expresión [determinada por Western blot, luego de 5 hs de incubación] de catalasa (control: 1±0,1; PGD2: 2,22±0,1*; X±SEM; *P<0,05) y peroxirredoxina 1 (Pxr1) (control: 1±0,3; PGD2: 2,06±0,25*; X±SEM; *P<0,05) en células TM4. En resumen, estos resultados indican un rol pro-oxidante de PGD2 en células de Sertoli murinas TM4, y proponen la activación del sistema anti-oxidante en respuesta al estrés oxidativo.