Modulación de la actividad de telomerasa por la cochaperona de Hsp90, FK506-binding protein 51

ZGAJNAR NR, LAGADARI M, GALIGNIANA MD

Congreso; LIX Reunión Anual de SAIC; 2014

Las inmunofilinas de alto PM (IMMs) poseen dominios TPR a través de los cuales se asocian a Hsp90, y un dominio PPIasa que tiene actividad de peptidil-prolil-cis/trans-isomerasa que se inhibe al unir al macrólido FK506. La IMM FKBP51 está involucrada en la regulación de la respuesta de varios factores transcripcionales como receptores esteroidales, p53, NF-kB, etc. Recientemente demostramos que una fracción importante de FKBP51 se localiza en la mitocondria, posee acción antiapoptótica, y se encuentra sobreexpresada en varios tipos de tumores. Por otra parte, la actividad de telomerasa es responsable de elongar los telómeros durante cada división celular, siendo esencial para la rápida expansión clonal. Es por ello que su actividad es elevada en células tumorales, germinales y primordiales. Su subunidad catalítica (hTERT) se asocia a Hsp90, Hsp70 y p23. Dado que FKBR51 tiene la capacidad de asociarse a Hsp90, estudiamos si esta IMM forma parte de los complejos de hTERT y cuál es su eventual función. La inmunoprecipitación de hTERT en células HeLa reveló la presencia de FKBP51 de manera Hsp90-dependiente. Tratamientos con el inhibidor de Hsp90 geladanamicina o la sobreexpresión del dominio TPR favorecen la disociación de la IMM. Estudios de IFI por microscopía confocal mostraron colocalización de hTERT y FKBP51, tanto en condiciones normales como en condiciones de estrés oxidativo como las que se generan en células tumorales. FKBP51 mostró exacerbar la actividad enzimática de telomerasa (TRAP-eze, Intergen), lo que está acorde con el rol ya observado en células tumorales. A su vez, tal actividad fue inhibida por la sobreexpresión de una mutante puntual de FKBP51 en su dominio TPR (es incapaz de unir Hsp90), y se vió exacerbada por inhibidores de la actividad PPIasa como FK506 o por la sobreexpresión de una mutante puntual inactiva para PPIasa. Nuestro estudio demuestra por primera vez la regulación de la actividad de telomerasa por esta inmunofilina de alto PM.