IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Movilización de fosfatidilserina en ovocitos de ratón
Autor/es:
GÓMEZ ELÍAS, MATÍAS D.; CURIA, CLAUDIO A.; STEIN, PAULA; BUSSO, DOLORES; SCHULTZ, RICHARD M.; CUASNICÚ, PATRICIA S.; COHEN, DÉBORA J.
Lugar:
Valdivia
Reunión:
Congreso; XXV REUNIÓN ANUAL DE LA SOCIEDAD CHILENA DE REPRODUCCIÓN Y DESARROLLO; 2014
Resumen:
La fosfatidilserina (PS) está normalmente localizada en la cara interna de la membrana plasmática y su translocación dependiente de Ca2+ a la cara externa es un requisito en diferentes procesos celulares distintos a la apoptosis. Dado que el Ca2+ también cumple un rol fundamental en la fisiología del ovocito, evaluamos la movilización de PS en ovocitos de ratón. Los ovocitos fertilizados presentan marca fluorescente para Anexina 5-FITC, proteína que se une específicamente a PS, lo que indica la exposición de PS luego de la fertilización. La fluorescencia fue observada en la superficie del ovocito con excepción de la región que recubre el huso meiótico y la de entrada del espermatozoide. La exposición de PS es transitoria, no detectándose en el momento de la primera división mitótica. Ensayos de RT-PCR mostraron que el ovocito de ratón expresa la flipasa Atp8a1 y las escramblasas Plscr1 y 3, responsables de la movilización de PS en las membranas celulares. La activación partenogenética de ovocitos con SrCl2 mostró que la exposición de PS es independiente de la presencia del espermatozoide. La utilización del quelante de Ca2+ BAPTA-AM, de ovocitos provenientes de hembras deficientes en CaMKIIγ y de ovocitos activados con el quelante de Zn2+ TPEN indica que la exposición de PS es dependiente de Ca2+ e independiente de la reasunción de la meiosis. Más aun, también se observó externalización de PS cuando los ovocitos fueron activados con etanol o 2-APB, pero no con ionóforo de Ca2+ o thimerosal, sugiriendo que el origen del Ca2+ es importante para dicha exposición. Finalmente, observamos que la externalización de PS requiere de un citoesqueleto de actinadinámico. En conjunto, los resultados muestran por primera vez que el aumento de Ca2+ que ocurre durante la activación del ovocito induce una exposición transitoria de PS que no está asociada a apoptosis.