La proteína CRISP1 del cumulus como moduladora de la motilidad y orientación del espermatozoide a través de su capacidad de regular canales de calcio

MARIANA WEIGEL MUÑOZ,; MARÍA A. BATTISTONE; GUSTAVO VASEN; GERARDO ORTA; DULCE FIGUEIRAS-FIERRO; JOSÉ LUIS DE LA VEGA- BELTRAN; LUDMILA CURCI; ALEJANDRO GUIDOBALDI; LAURA GIOJALAS; ALBERTO DARSZON; DÉBORA J. COHEN; PATRICIA S. CUASNICÚ

Mar del Plata

Congreso; LIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Recientes estudios de nuestro grupo indican que la proteína CRISP1 (Cysteine Rich Secretory Protein) presente mayoritariamente en el tracto reproductor masculino, es expresada también por las células del cúmulus que rodean al ovocito, donde cumpliría un rol orientador de los espermatozoides durante la etapa de penetración del cúmulus. En base a ello, el objetivo del presente trabajo ha sido estudiar el mecanismo por el cual CRISP1 regula dicho proceso. Dado que la orientación de un espermatozoide está vinculada al movimiento de su flagelo, en primer lugar evaluamos el efecto de CRISP1 sobre la hiperactividad (HA), motilidad vigorosa característica de los espermatozoides capacitados. Los resultados indicaron que la población de espermatozoides expuestos a CRISP1 presentaba una disminución significativa en el porcentaje de HA respecto a los controles. Más aun, observamos que el porcentaje de HA de la población orientada era significativamente menor que el de la no orientada. El efecto de CRISP1 sobre la HA fue luego confirmado a través de la evaluación objetiva de diferentes parámetros de motilidad asociados a la HA mediante CASA (Computer Assisted Semen Analysis). Teniendo en cuenta el rol crítico que juega la movilización de Ca2+ en la motilidad espermática, posteriormente evaluamos la capacidad de CRISP1 de regular canales iónicos. Los resultados mostraron que CRISP1 nativa, pero no así desnaturalizada, fue capaz de inhibir tanto la corriente basal de Cs+ como la estimulada por mentol, indicando la capacidad de la proteína de regular al canal de Ca2+ TRPM8. En conjunto, estos resultados indican que CRISP1 sería capaz de regular la motilidad y orientación de los espermatozoides a través de su capacidad de regular canales de Ca2+, apoyando la existencia de un novedoso mecanismo de modulación fina de la orientación y de la HA del espermatozoide necesaria para la correcta penetración del cúmulus durante el proceso de fertilización.