Análisis de la expresión de bcl-2 y bax en neuroblastomas humanos sh-sy5y tratados con rotenona. Efectos neuroprotectores anemopoegma mirandum (CATUABA)

VALVERDE GOMES DE ANDRADE, D; OLIVEIRA, D.; SAMPAIO, G.E.; BOTI, V.B.; SARACENO, E.; COIRINI, H.; CAPANI, F.; GIRALDEZ ALVAREZ, L.

Hotel 13 de Julio, Ciudad de Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto neuroprotector de un extracto de Anemopoegma mirandum (CATUABA), en un modelo experimental de la Enfermedad de Parkinson (EP) mediante el análisis de la expresión de las proteínas Bcl-2 involucradas en procesos apoptoticos. El modelo de EP utilizado se basa en la aplicación del herbicida rotenona en cultivos de neuroblastomas humanos (NB-SY5Y). Las células fueron cultivadas a 37ºC en DMEM/F12 durante 72 horas a una densidad de 20.000 células/pozo y luego tratadas por 48 horas con rotenona 300 nM y/o el extracto de CATUABA disuelto en dimetilsulfóxido a las concentraciones de 0.031; 0.625 y 1.25 mg/µl. La viabilidad celular fue cuantificada usando bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazoliun (MTT). Para evaluar la apoptosis se analizó la expresión de las proteínas Bcl-2 y Bax mediante immunoblotting. Cuando los NB-SY5Y fueron tratados con rotenona 300 nM se observó una mortalidad del 35% respecto a los controles. Cuando los NB-SY5Y fueron tratados con rotenona en presencia del extracto de CATUABA no se observó mortalidad celular o cambios morfológicos estadísticamente significativos con respecto a los controles tanto al microscopio óptico como electrónico (p<0,01, control vs.tratados). El extracto de catuaba no causo efectos citotóxicos significativos en las concentraciones estudiadas. Nuestros resultados también mostraron una regulación negativa de Bax y una regulación positiva de Bcl-2, indicando que los extractos de Anemopoegma mirandum (CATUABA) podrían presentar un posible potencial farmacológico para el tratamiento de la Enfermedad de Parkinson que involucre procesos apoptóticos mediados por la familia de proteínas Bax o Bcl-2. Supported by PRODOC/FAPESB 016/2004, FAPESB/CNPq 159/2003, M020, ANPCYT 15001, PID 5784