IBYME   02675
INSTITUTO DE BIOLOGIA Y MEDICINA EXPERIMENTAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Movilización de fosfatidilserina en el ovocito de ratón.
Autor/es:
GOMEZ ELIAS M; CURIA A; STEIN P; BUSSO D; SCHULTZ RM; CUASNICU, PS; COHEN DJ
Reunión:
Jornada; Jornada SAB-SAIC: Lípidos en Reproducción; 2014
Resumen:
La fosfatidilserina (PS) está
normalmente localizada en la cara interna de la membrana plasmática y su
translocación dependiente de Ca2+ a la cara externa es un requisito
en diferentes procesos celulares distintos a la apoptosis. Dado que el Ca2+
también cumple un rol fundamental en la fisiología del ovocito, evaluamos la
movilización de PS en ovocitos de ratón. Los ovocitos fertilizados tanto in
vivo como in vitro presentan marca fluorescente para Anexina 5-FITC, proteína
que se une específicamente a PS, lo que indica la exposición de PS luego de la
fertilización. La fluorescencia fue observada en la superficie del ovocito con
excepción de la región que recubre el huso meiótico y la de entrada del
espermatozoide. La exposición de PS es transitoria, no detectándose en el
momento de la primera división mitótica. Ensayos de RT-PCR mostraron que el
ovocito de ratón expresa la flipasa Atp8a1
y las escramblasas Plscr1, 3 y
Tmem16f, responsables de la movilización de PS en las membranas celulares.
La activación partenogenética de ovocitos con SrCl2 mostró que la
exposición de PS es independiente de la presencia del espermatozoide. La
utilización del quelante de Ca2+ BAPTA-AM, de ovocitos provenientes
de hembras deficientes en CaMKIIγ
y de ovocitos activados con el quelante de Zn2+ TPEN indica que la
exposición de PS es dependiente de Ca2+ e independiente de la
reasunción de la meiosis. Más aun, la externalización de PS también fue
observada cuando los ovocitos fueron activados con etanol o 2-APB, pero no con
ionóforo de Ca2+ o thimerosal, sugiriendo que el origen del Ca2+
es importante para dicha exposición. Finalmente, observamos que la
externalización de PS requiere de un citoesqueleto de actina dinámico. En
conjunto, los resultados muestran por primera vez que el aumento de Ca2+ que ocurre durante la
activación del ovocito induce una exposición transitoria de PS que no está
asociada a apoptosis.