Nueva función a nivel citoplasmático de HP (Heterocromatin Protein)1gama, proteína hasta el presente sólo descripta en el núcleo, y su rol durante la miogénesis

NANCY L. CHARÓ; SEBASTIÁN SUSPERREGUY; JUDITH TONEATTO; GRACIELA PIWIEN PILIPUK

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual SAIC, Reunión Anual SAFIS y XLV Reunión Anual SAFE; 2013

SAIC

HP1gama es una proteína nuclear no histónica que participa en el control de la transcripción a través de su interacción con la RNA polimerasa II así como en la organización de la compactación de la cromatina, entre otras funciones. Ello nos condujo a estudiar en detalle su distribución subnuclear así como a los factores que con ella interactúan durante procesos de diferenciación tales como el adipogénico y el miogénico. Empleando inmunofluorescencia indirecta (IFI) y microscopía confocal, llamativamente observamos que en mioblastos C2C12, HP1gama se localiza no sólo en el núcleo sino también en el citoplasma. Luego de 4 días de inducida la diferenciación de los mioblastos, HP1gama, sigue siendo detectada en el citoplasma adoptando un patrón filamentoso que co-localiza parcialmente con actina, demostrándose mediante ensayos de inmunoprecipitación que ambas proteínas interactúan. En cambio, HP1alfa, otro miembro de la familia de las HP1 altamente homóloga, se encuentra presente exclusivamente en el núcleo tanto en mioblastos como en miotubos. Análisis por Western blot (WB) de las fracciones nucleares y citoplasmáticas de mioblastos y miotubos demuestra que HP1gama se encuentra en ambas fracciones mientras HP1alfa es sólo nuclear. En miofibrillas aisladas de músculo estriado de ratón, observamos que HP1gama se localiza en las bandas I colocalizando parcialmente con actina. Fraccionamiento núcleo-citoplasmático de musculo estriado, cardíaco y liso de ratón, evidencian en todos los casos una banda mayoritaria de HP1gama en la fracción citoplasmática. Para investigar la importancia funcional de HP1gama durante el proceso de miogénesis, se generaron mioblastos C2C12 en los que se interfirió la expresión de HP1gama de manera estable empleando shRNA. Las C2C12 HP1gama-/- no se diferenciaron. En síntesis, HP1gama no es una proteína exclusivamente nuclear, es necesaria para la diferenciación de los mioblastos y postulamos un nuevo rol para la misma en la formación/estabilidad y/o contractilidad de la fibra muscular esquelética.