Papel de MRP4 en la proliferación y progresión del ciclo celular en modelos de adenocarcinomas ductales pancreáticos.

CAROZZO A; DIEZ F; SHAYO C; FERNANDEZ N; DAVIO C

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica. Reunión Científica Anual 2013 Sociedad Argentina de Fisiología. XLV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2013

SAIC

Los adecarcinomas ductales pancreáticos (PDAC) presentan con alta frecuencia una expresión elevada de Gαs y de sustratos de PKA fosforilados. Esto sugiere que en este tipo de tumores es frecuente la desregulación de la vía del AMPc, agente involucrado en el crecimiento y la diferenciación celular. En líneas celulares de PDAC (BxPC3, HPAF y PANC1) describimos que la exclusión de AMPc es mediada por MRP4 y observamos una correlación entre el grado de expresión de MRP4 y la malignidad de las mismas. Dada su elevada tasa de mortalidad y a fin de establecer un posible blanco terapéutico, nos propusimos evaluar el efecto de la inhibición de MRP4 sobre la biología tumoral de PDAC. El tratamiento con Probenecid y MK571 (inhibidores inespecíficos de MRPs) condujo a una disminución significativa en la proliferación de las 3 líneas ensayadas. Mediante la evaluación de la viabilidad celular con azul tripán y del ciclo celular por citometría de flujo observamos que esta disminución es consecuencia del arresto en la fase G0/G1 y no producto de un efecto citotóxico de los tratamientos. El silenciamiento específico de MRP4 en PANC1 mediante RNAi produjo una disminución de la proliferación celular del 45±4% a las 72h junto a un aumento del 20±2% de la población en fase G0/G1. Para discriminar si este efecto es consecuencia del incremento en los niveles de AMPci o a la falta de AMPce, tratamos las células con 10uM de AMPc y observamos que dicho tratamiento restaura parcialmente la capacidad proliferativa y el arresto celular producto de la inhibición farmacológica y el silenciamiento de MRP4. Estos resultados sugieren que la exclusión de AMPc al espacio extracelular es crítica para la biología tumoral de PDAC y que este mensajero podría estar actuando en el medio extracelular como un factor autócrino/parácrino estimulando la proliferación. En base a estas observaciones proponemos a MRP4 como potencial blanco terapéutico para tratamiento de PDAC.