Vía de Notch y su modulación como posible blanco terapéutico en meduloblastoma

ANSELMINO, N; ALONSO N; FERMÁNDEZ, NB; BALDI A; DAVIO C; SHAYO C; GARCIA C

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica. Reunión Científica Anual 2013 Sociedad Argentina de Fisiología. XLV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2013

SAIC

Los tumores de SNC son el segundo cáncer más prevalente en niños y la principal causa de muerte asociada a esta enfermedad, siendo el meduloblastoma (MB) el tumor más frecuente. La terapia actual se centra en las diferencias entre células normales y tumorales. Diversas vías de señalización están alteradas en MB, entre ellas la vía de Notch. La sobrexpresión de Notch1 (N1) inhibe el crecimiento tumoral mientras que Notch2 (N2) lo favorece. El objetivo de este trabajo fue caracterizar las vías de señalización involucradas en la activación de N1 y N2. Utilizamos células HEK293 y células Daoy de MB transfectadas con un plásmido control o los fragmentos intracelulares N1 (NICD1) y N2 (NICD2) y analizamos la expresión de diversos componentes de la vía de señalización. Se evaluó por WB la expresión de STAT3, pAKT, pERK y PTEN y por PCR los ligandos Jagged2 y Delta-like1 y los genes blanco Hes1 y Hes5. En células HEK293 la sobreexpresión de NICD1 aumenta pSTAT3Y705 y pAKT e induce la expresión de Jagged2, Hes1 y Hes5. NICD2 aumenta pSTAT3Y705 y PTEN y la expresión de Hes1, Hes5, Jagged2 y Delta-like1. Tanto NICD1 como NICD2 disminuyen la fosforilación de ERK. Resultados similares se obtuvieron para la línea celular Daoy. En ensayos en agar blando con células Daoy NICD1 inhibe la formación y el crecimiento de colonias, mientras que NICD2 se comporta de forma similar al control. El tratamiento de células Daoy con inhibidores de la vía PI3K/AKT (Ly294002 o Wortmannin) no afectó la fosforilación de ERK. Sin embargo, los inhibidores de la vía de ERK (PD98059 y UO126) produjeron una disminución en la fosforilación de AKT, lo que sugeriría que ERK regularía la vía de PI3K/AKT. La expresión de componentes diferentes de las vías de señalización inducida por N1 y N2 podría explicar los efectos opuestos reportados. El conocimiento de las vías involucradas en la activación de N1 y N2 permitirá comprender el proceso de tumorigénesis y realizar una terapia antitumoral más efectiva.